INSECTICIDAL XNGROEL PROTEIN OF XENORHABDUS NEMATOPHILA

The present invention relates to a novel insecticidal protein named XnGroEL isolated and purified from Xenorhabdus nematophila having GENE BANK ACCESSION No. AY18449. The process for the purification of novel insecticidal protein named XnGroEL is also disclosed. The invention also relates to the process for preparation and purification of the recombinant novel insecticidal XnGroEL protein. The process involves purification of a novel insecticidal protein Xenorhabdus nematophila, construction of genomic DNA library, screening of library using probes with N-terminal amino acid sequence, cloning in an expression vector followed by its transformation in E. coli cells and purification of the recombinant protein. Both the novel native and recombinant insecticidal XnGroEL protein have growth inhibitory and insecticidal property for Helico?erpa armigera larvae. The present invention also discloses that the novel native and recombinant insecticidal XnGroEL protein has larval gut brush border membrane vesicles binding activity and a-chitin binding activity. La présente invention porte sur une nouvelle protéine insecticide appelée XnGroEL isolée et purifiée à partir de Xenorhabdus nematophila ayant le numéro de matricule dans la BANQUE DE GENES No. AY18449. Le procédé pour la purification d'une nouvelle protéine insecticide appelée XnGroEL est également décrit. L'invention porte également sur le procédé pour la préparation et la purification de la nouvelle protéine XnGroEL insecticide recombinante. Le procédé met en jeu la purification d'une nouvelle protéine insecticide Xenorhabdus nematophila, la construction d'une bibliothèque d'ADN génomiques, le criblage de la bibliothèque à l'aide de sondes avec une séquence d'acides aminés N-terminale, le clonage dans un vecteur d'expression suivi par sa transformation dans des cellules d'E. coli et la purification de la protéine recombinante. Les nouvelles protéines XnGroEL insecticides à la fois native et recombinante ont une propriété inhibitrice de la croissance et insecticide pour des larves Helicoverpa armigera. La présente invention décrit également que les nouvelles protéines XnGroEL insecticides native et recombinante ont une activité de liaison à des vésicules de membrane de limite en brosse d'intestins de larve et une activité de liaison à l'a-chitine.