DETECTION OF ENZYMES AND MICROORGANISMS AND DEVICES THEREFOR

The present invention relates to methods for detecting the amount of an enzyme of interest, which may be expressed by a microorganism, in a sample, such methods comprising: (a) incubating a reaction mixture comprising the sample and at least one substrate which can be acted on by the enzyme; (b) contacting an electrochemical sensor with the reaction mixture comprising the sample either: (i) after a selected time of incubation of the reaction mixture or (ii) at the same time as or soon after preparing the reaction mixture, wherein the sensor comprises a working electrode which has immobilised therein or thereto a second enzyme which is capable of acting on a substance selected from one or more of the at least one substrate and a product resulting from action of the enzyme of interest on the at least one substrate; wherein action of the second enzyme on the at least one substrate or product results in a change in electric potential at said working electrode; (c) either: (i) detecting the change in electrical potential at the working electrode after the contacting in step (b)(i); or (ii) determining the period of time required for the electric potential at the working electrode to return to a substantially steady baseline value after the contacting in step (b)(ii); and (d) determining from the change in potential detected at step (c)(i) or period of time determined at step (c)(ii) the amount of enzyme of interest in the sample. The invention also relates to sensors suitable for such methods. La présente invention concerne des méthodes destinées à détecter la quantité d'une enzyme d'intérêt pouvant être exprimée par un micro-organisme dans un échantillon. Ces méthodes consistent (a) à incuber un mélange réactionnel comprenant l'échantillon et au moins un substrat sur lequel l'enzyme peut agir, (b) à mettre un capteur électrochimique en contact avec le mélange réactionnel comprenant l'échantillon (i) après une durée sélectionnée d'incubation du mélange réactionnel ou (ii) pendant ou juste après la préparation du mélange réactionnel, ledit capteur comprenant une électrode de travail dans laquelle ou sur laquelle est immobilisée une seconde enzyme pouvant agir sur une substance choisie parmi le ou les substrats et/ou un produit résultant de l'action de l'enzyme d'intérêt sur ce ou ces substrats, l'action de la seconde enzyme sur le ou les substrats ou le produit provoquant un changement de potentiel électrique au niveau de l'électrode de travail, (c) (i) à détect