METHOD OF CONSTRUCTING ARTIFICIALLY POSITIVE CONTROL DNAS FOR MULTIPLEX PCR

It is intended to provide a method of constructing artificial control DNAs for multiplex PCR characterized by comprising conducting the following steps (a) to (c) for each multiplex PCR primer: (a) the step of selecting a region having an arbitrary number (from 50 to 2000) of bases in an available DNA having a known sequence; (b) the step of synthesizing a primer pair for constructing an artificial positive control consisting of a forward primer for constructing an artificial positive control wherein 10 to 30 bases at the 5'-terminus of the region selected in the above step (a) is attached to the 3'-side of a forward primer for multiplex PCR and a reverse primer for constructing an artificial positive control wherein 10 to 30 bases at the 3'-terminus of the region selected in the above step (a) is attached to the 3'-side of a reverse primer for multiplex PCR; and (c) the step of using the available DNA having a known sequence as described above as a template and conducting PCR by using the primer pair for constructing an artificial positive control having been synthesized in the above step (b) to thereby construct an artificial positive control DNA as the amplification product. L'invention concerne un procédé de construction d'ADN témoins artificiels pour PCR multiplexe et caractérisé par le fait qu'il comprend la conduite des étapes suivantes (a) à (c) pour chaque amorce de PCR multiplexe : (a) l'étape de sélection d'une région ayant un nombre arbitraire (de 50 à 2000) de bases dans un ADN disponible ayant une séquence connue ; (b) l'étape de synthèse d'une paire d'amorces permettant de construire un témoin positif artificiel constitué d'une amorce directe permettant de construire un témoin positif artificiel dans lequel 10 à 30 bases à l'extrémité terminale 5' de la région sélectionnée dans l'étape (a) ci-dessus sont attachées au côté 3' d'une amorce directe pour PCR multiplexe et une amorce inverse permettant de construire un témoin positif artificiel dans lequel 10 à 30 bases à l'extrémité terminale 3' de la région sélectionnée dans l'étape (a) ci-dessus sont attachées au côté 3' d'une amorce inverse pour PCR multiplexe ; et (c) l'étape d'utilisation de l'ADN disponible ayant une séquence connue comme celle décrite ci-dessus comme matrice et de conduite d'une PCR par l'utilisation de la paire d'amorces permettant la construction d'un témoin positif artificiel ayant été synthétisé dans l'étape (b) ci-dessus permettant ainsi de construire un ADN témoin p