METHODS AND COMPOSITIONS FOR DETECTING POLYNUCLEOTIDES

Methods of determining the presence or amount of a target polynucleotide in a sample are provided. A sample that contains a target polynucleotide, a polynucleotide that may include nucleic acid analogs and that is complementary to a target nucleic acid sequence of the target polynucleotide, and a dye for which the rate of change in an optical property is different in the presence and absence of a target polynucleotide/polynucleotide hybrid are combined to produce a reaction mixture. The rate of change in an optical property of the dye in the reaction mixture is compared to a reference value characteristic of the rate of change in the optical property of the dye in a similar reaction mixture containing a known amount of a polynucleotide/polynucleotide hybrid to determine a relative rate of change in the optical property. The relative rate of change in the optical property of dye in the reaction mixture is correlated with the presence or amount of the specified target polynucleotide in the sample. L'invention concerne des procédés de détermination de la présence ou de la quantité d'un polynucléotide cible dans un échantillon. Un échantillon contenant un polynucléotide cible, un polynucléotide pouvant comprendre des analogues d'acides nucléiques et complémentaire d'une séquence d'acides nucléiques cible du polynucléotide cible, et un colorant dont le taux de variation d'une propriété optique est différent en présence et en l'absence d'un polynucléotide/hybride de polynucléotide cible sont combinés afin de préparer un mélange réactionnel. Le taux de variation d'une propriété optique du colorant dans le mélange réactionnel est comparé à une valeur de référence caractéristique du taux de variation de la propriété optique du colorant dans un mélange réactionnel similaire contenant une quantité connue d'un polynucléotide/hybride de polynucléotide afin de déterminer un taux de variation relatif de la propriété optique. Le taux de variation relatif de la propriété optique du colorant dans le mélange réactionnel est corrélé avec la présence ou la quantité du polynucléotide cible spécifié dans l'échantillon.