METHOD OF CULTIVATION OF HUMAN MESENCHYMAL STEM CELLS, PARTICULARLY FOR THE TREATMENT OF NON-HEALING FRACTURES, AND BIOREACTOR FOR CARRYING OUT THIS CULTIVATION METHOD

The invention relates to a novel method of cultivation of mesenchymal stem cells, wherein after aseptic separation of mononuclear cells from the marrow blood, said cells are seeded in low density into sterile plastic cultivation vessels and cultivated for approximately one to three weeks in CellGroTM Hematopoietic Stem Cell Medium, certified for the clinical use, with an addition of 10% human serum and supplements, wherein the supplements are added at least once in the course of the cultivation, without removal of hematopoietic cells and without medium exchange during the cultivation procedure, without any interference with the closed cultivation system, under the standard conditions for the cultivation of tissue cultures. For the cultivation of the mesenchymal stem cells in the closed cultivation system for the clinical use in the field of orthopaedic surgery, a simple bioreactor is proposed. The bioreactor consists of a cassette system containing cultivation vessels with filters for securing the sterile exchange of gas and with aseptic inlets for seeding and harvesting the cells and adding the supplements, and a carrier. L'invention concerne un nouveau procédé de culture de cellules souches mésenchymateuses au cours duquel, après une séparation aseptique des cellules mononucléaires du sang médullaire, lesdites cellules sont semées à faible densité dans des récipients de culture stériles en plastique et cultivées pendant approximativement une à trois semaines dans un milieu de cellules souches hématopoïétiques CellGroTM certifié pour usage clinique avec ajout de 10 % de sérum humain et de suppléments, lesdits suppléments étant ajoutés au moins une fois au cours de la culture, sans retrait des cellules hématopoïétiques et sans changement de milieu pendant la culture, sans aucune interférence avec le système de culture clos et dans les conditions standard de cultures tissulaires. Pour la culture des cellules souches mésenchymateuses dans le système de culture clos à usage clinique en chirurgie orthopédique, l'invention propose un simple bioréacteur. Le bioréacteur se compose d'un système à cassettes contenant des récipients de culture avec des filtres pour garantir les échanges gazeux stériles et des entrées aseptiques pour semer et récolter les cellules ou ajouter les suppléments et un porteur.