CELL-FREE BIOSYNTHESIS OF NUCLEIC ACID

The invention provides for a process to make high quality DNA in a cell-free system, free of bacteria contaminants, and optimally free of flanking bacterial gene coding sequences which can minimize or silence gene expression when used for expression inside a target cell. The cell-free system herein is a rapid method that produces a high fidelity, cleaner end product suitable for therapeutic applications with less effort and expense, and can be adapted to amplification of plasmid-like templates lacking unnecessary bacterial plasmid gene sequences. This increases efficiency of the system and increases the effectiveness of the end product expression vector. The end product can be easily used as a DNA therapeutic due to low incidence of bacterial cell components and bacterial toxins. The invention also provides a method for the production of DNA for any research or therapeutic purpose that is essentially free of inherent bacterial cell contaminants and/or bacterial toxins, as well as for the end product therapeutics including DNA vaccines. La présente invention concerne un processus permettant de produire un ADN de haute qualité dans un système sans cellule, exempt d'impuretés bactériennes et exempt de manière optimale de séquences codantes pour des gènes bactériens qui peuvent minimiser ou rendre silencieux une expression de gène lorsqu'elle est utilisée pour l'expression à l'intérieur d'une cellule cible. Ce système sans cellule est un procédé rapide qui fournit un produit final hautement fidèle, plus propre convenant pour des applications thérapeutiques avec moins d'efforts et de dépenses et, qui peut être adapté à l'amplification de matrices de type plasmide manquant de séquences de gènes plasmide bactériennes non nécessaires. Ceci permet d'accroître l'efficacité du système et d'accroître l'efficacité du vecteur d'expression de produit final. Ce produit final peut être facilement utilisé comme ADN thérapeutique du fait de la faible incidence des composants de cellule bactérienne et des toxines bactériennes. Cette invention concerne aussi un procédé de production d'ADN pour quelque recherche ou quelque but thérapeutique que ce soit, qui est sensiblement exempt d'impuretés de cellule bactérienne, ainsi qu'une thérapeutique de produit fini comprenant des vaccins ADN.