ALLEVIATION OF NON-SPECIFIC BINDING IN MICROARRAY ASSAYS

A post-incubation treatment is employed to effectively remove targets, such as proteins/protein complexes, or other label-bearing moieties that may non-specifically bind to a microarray substrate during a binding assay. Following incubation, a one­step wash is carried out with a liquid containing digester, e.g., a digestive enzyme (protease) or lysosome, which is effective to remove non-specifically bound targets or at least labeled portions of such targets from the substrate. Proteases are bound to or coated onto large molecules or onto solid particles of such a size such that they are prohibited from entering the porous surfaces of 3-D hydrogel microspots and are unable to reach and digest labeled target-probe complexes that are disposed within such porous hydrogel microspots. Digested segments of such protein which contain labels (or of essentially the entire protein) are carried away in the wash liquid and thus are not present to create background noise during imaging. Un traitement post-incubation est utilisé pour éliminer efficacement des cibles, telles que des protéines/complexes de protéines ou d'autre fractions porteuses d'étiquette pouvant se fixer non spécifiquement à un substrat de microréseaux lors d'un titrage par liaison. Après incubation, un lavage en une étape est exécuté à l'aide d'un digesteur contenant un liquide, par exemple une enzyme digestive (protéase) ou lysosome, qui élimine efficacement les cibles non liées spécifiquement ou au moins des parties marquées de telles cibles d'un substrat. Les protéases sont liées à ou appliquées en couche sur de grandes molécules ou sur des particules solides d'une taille telle qu'elles sont empêchées d'entrer dans les surfaces poreuses de micropoints d'hydrogel 3-D et elle sont incapables d'atteindre et de digérer de complexes cible-sonde marqués qui sont disposés à l'intérieur desdits micropoints d'hydrogel poreux. Les segments digérés d'une telle protéine contenant des étiquettes (ou essentiellement toute la protéine) sont évacués dans le liquide de lavage et ainsi leur absence empêche la création de bruit de fond pendant l'imagerie.