ENZYME AND PREPARATION METHOD

A method for preparing a soluble protein comprising a modified form of urokinase-type plasminogen activator (uPA) or an active fragment thereof, or a variant of either of these which has uPA activity, which method comprises contacting said protein with a buffer at a pH of from 8.5-10.5, said buffer comprising a reducing agent and an oxidising agent which forms a redox pair, wherein the reducing agent is present in excess compared to the oxidising agent, and wherein the reducing agent is present in a concentration of at least 5 mM. Material obtainable in this way forms a further aspect of the invention. It has been refolded in a "native-like" form and is useful in studies such as NMR analysis to detect ligands. L'invention concerne un méthode de préparation d'une protéine soluble comprenant une forme modifiée d'un activateur plasminogène de type urokinase (uPA), ou un fragment actif de celui-ci, ou un variant de l'un ou de l'autre, présentant une activité uPA. La méthode de l'invention consiste à mettre en contact ladite protéine avec un tampon, à un pH compris entre 8,5 et 10,5. Le tampon comprend un agent de réduction et un agent d'oxydation qui forment une paire d'oxydoréduction. L'agent de réduction est présent en excès par rapport à l'agent d'oxydation. L'agent de réduction est présent à une concentration d'au moins 5 mM. L'invention concerne également la matière obtenue par la méthode susmentionnée. Cette matière a été repliée sous une forme de type "native", et est utilisée dans des recherches, notamment des analyses NMR destinées à détecter des ligands.