MODIFIED POLYNUCLEOTIDES FOR USE IN RNA INTERFERENCE

Methods and compositions for performing RNA interference comprising a wide variety of stabilized siRNAs suitable for use in serum-containing media and for in vivo applications, such as therapeutic applications, are provided. These siRNAs permit effective and efficient applications of RNA interference to applications such as diagnostics and therapeutics through the use of one or more modifications including orthoesters, terminal conjugates, modified linkages and 2'modified nucleotides. Uniquely modified siRNAs have been developed that reduces off-target effects incurred in gene-silencing. The modifications include phosphorylation of the first 5' terminal antisense nucleotide; 2' carbon modifications of the first and second or first, second, and third 5' terminal antisense nucleotides; and optionally 2' carbon modifications of the first and second or first, second, and third 5' terminal sense nucleotide. Control and exaequo molecules are also provided. siRNA molecules and related control, trackability and exaequo agents with specific stability modifications were developed. L'invention concerne des procédés et des compositions permettant de réaliser l'interférence ARN, comprenant une large variété de petits ARN interférents (siRNA) stabilisés qui peuvent être utilisés dans un milieu contenant un sérum et dans des applicationsin vivo, telles que les applications thérapeutiques. Ces siRNA permettent une application efficace de l'interférence ARN dans des applications telles que les applications diagnostiques ou thérapeutiques, grâce à l'inclusion d'une ou de plusieurs modifications, notamment des orthoesters, des conjugués d'extrémités, des liaisons modifiées et des nucléotides modifiés en position 2'. L'invention concerne en outre des siRNA modifiés uniques qui réduisent les effets hors cible se produisant lors de l'extinction génique. Ces modifications comprennent la phosphorylation du premier nucléotide antisens de l'extrémité 5', des modifications du carbone 2' du premier et du second, ou des premier, second et troisième nucléotides antisens de l'extrémité 5', et éventuellement des modifications du carbone 2' du premier et du second, ou des premier, second et troisième nucléotides sens de l'extrémité 5'. L'invention concerne également des molécules de référence et des molécules ex aequo. L'invention concerne des molécules siARN, et des agents de référence, des agents de localisation, et des agents ex aequo présentant des modifications de stabilité spécifiqu