PROCESS FOR PREPARING AN ADENOVIRUS-CONTAINING PREPARATION

A process for preparing an adenovirus-containing preparation for in vivo somatic gene transfer to the myocardium or endothelium of large animals, comprising the steps of (i) generating adenovirus in a bioreactor under predetermined conditions for obtaining an adenovirus-containing medium; (ii) optionally separating of adenovirus from the adenovirus-containing medium of step (i) by filtration to obtain an adenovirus-containing filtrate; (iii) concentrating the adenovirus-containing medium of step (i) or the adenovirus-containing filtrate of step (ii) to obtain a adenovirus-containing concentrate; (iv) batch purification of the adenovirus-containing concentrate of step (iii) by a Fast Protein Liquid Chromatography (FPLC) in at least two steps at a pressure of less than 0.3 MPa and a volume of at least 200 ml to obtain an adenovirus-containing batch; (v) optionally concentrating the adenovirus-containing batch of step (iv) to obtain a concentrated adenovirus-containing batch; and (vi) optionally dialysis of the adenovirus-containing batch of step (iv) or the concentrated adenovirus-containing batch of step (v), to obtain an adenovirus-containing preparation. La présente invention concerne un procédé pour élaborer une préparation contenant un adénovirus en vue d'un transfert in vivo de gènes somatiques vers le myocarde ou l'endothélium de grands animaux. A cet effet, on commence par (i) générer un adénovirus dans un bioréacteur dans des conditions définies pour l'obtention d'un milieu contenant un adénovirus. On sépare (ii) ensuite l'adénovirus du milieu contenant l'adénovirus obtenu en (i) par filtration de façon à obtenir un filtrat contenant l'adénovirus. On concentre (iii) ensuite le milieu contenant l'adénovirus obtenu en (i) ou le filtrat contenant l'adénovirus obtenu en (ii) de façon à obtenir un concentrat contenant l'adénovirus. On réalise ensuite une purification par lots (iv) du concentrat contenant l'adénovirus obtenu en (iii). Cette purification se fait selon le procédé FPLC (Fast Protein Liquid Chromatography), c'est-à-dire "chromatographie rapide des protéines en phase liquide", en deux temps au moins à une pression n'excédant par 0,3 MPa avec un volume d'au moins 300 ml de façon à obtenir un lot contenant l'adénovirus. On concentre (v) ensuite éventuellement le lot contenant l'adénovirus issu de la purification par lots (iv) de façon à obtenir un lot concentré contenant l'adénovirus. Il ne reste plus qu'à effectuer éventuellement une dialyse (v