PROCESS FOR THE PRODUCTION OF POLYPEPTIDES IN MAMMALIAN CELL CULTURES
The invention provides a method for producing a polypeptide of interest which method comprises: providing a transformed host cell which comprises a nucleotide sequence which encodes a polypeptide of interest and which directs expression of the polypeptide of interest in the transformed host cell, or...
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Format: | Patent |
Sprache: | eng ; fre |
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Zusammenfassung: | The invention provides a method for producing a polypeptide of interest which method comprises: providing a transformed host cell which comprises a nucleotide sequence which encodes a polypeptide of interest and which directs expression of the polypeptide of interest in the transformed host cell, or a hybridoma which comprises a nucleotide sequence encoding a polypeptide of interest; providing a culture medium suitable for mammalian cell culture; and culturing the hybridoma or transformed host cell in the culture medium under conditions that allow for expression of the polypeptide of interest, wherein the culture medium (i) comprises water, a buffer, an energy source, amino acids, a lipid source or precursor, a source of iron, non-ferrous metal ions, inorganic salts, vitamins and cofactors; and (ii) is free from each of a plant-derived or animal-derived peptone, a functional protein, and a full-length polypeptide. The invention further relates to a transformed host cell and to suitable low-cost media applicable in the method of the present invention.
L'invention concerne une méthode permettant de produire un polypeptide d'intérêt. Ladite méthode consiste à fournir une cellule hôte transformée comprenant une séquence nucléotidique qui code pour le polypeptide d'intérêt et qui oriente l'expression dudit polypeptide dans la cellule hôte transformée, ou un hybride comprenant une séquence nucléotidique qui code pour le polypeptide d'intérêt; à fournir un milieu de culture approprié à une culture cellulaire de mammifère; et à cultiver l'hybridome ou la cellule hôte transformée dans le milieu de culture dans des conditions permettant l'expression du polypeptide d'intérêt. Le milieu de culture (i) comprend de l'eau, un tampon, une source d'énergie, des acides aminés, une source ou un précurseur lipidique, une source de fer, des ions métalliques non ferreux, des sels inorganiques, des vitamines et des cofacteurs; et (ii) est exempt de peptone dérivé d'une plante ou d'un animal, de protéine fonctionnelle, et de polypeptide pleine longueur. L'invention concerne également une cellule hôte transformée et un milieu approprié bon marché pouvant être utilisé dans la méthode de l'invention. |
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