NUCLEIC ACID SEQUENCES ENCODING TYPE III TENEBRIO ANTIFREEZE PROTEINS AND METHOD FOR ASSAYING ACTIVITY

Thermal hysteresis proteins and their nucleotide sequences derived from the Tenebrionoidea Superfamily which lower the freezing point of a solution without effecting the melting point. Related methods for preparing said proteins and for providing antifreeze or recrystallization inhibition properties to a subject formulation. Also provided is a recrystallisation inibition method for determining the presence, relative concentration, and/or activity of thermal hysteresis proteins comprising: providing a proteinaceous composition in a solvent to form a test solution; flash freezing said solution; raising the temperature of the frozen solution to an appropriate annealing temperature that allows for a partial melt, while limiting heterogeneity in ice grain sizes within said solution; maintaining said frozen solution at the annealing temperature for a length of time sufficient to allow for recrystallization; monitoring the ice crystal grain size changes over time; and determining the presence of functional thermal hysteresis proteins in said solution given the retention of significantly smaller ice crystal grain sizes relative to at least one control solution. L'invention concerne des protéines à hystérèse thermique et leurs séquences nucléotidiques dérivées de la superfamille Tenebrionoidea qui abaissent le point de congélation d'une solution sans qu'il soit nécessaire de réaliser le point de fusion. Elle concerne également des procédés permettant de préparer ces protéines et de fournir des propriétés antigel ou d'inhibition de la recristallisation à une formulation donnée. Elle concerne également un procédé d'inhibition de la recristallisation qui permet de déterminer la présence, la teneur relative et/ou l'activité de protéines à hystérèse thermique, et qui consiste à: fournir une composition protéique dans un solvant afin de former une solution d'essai; congeler rapidement cette solution; élever la température de la solution congelée à une température de recuit appropriée permettant une fusion partielle tout en réduisant l'hétérogénéité de la granulométrie de la glace dans cette solution; maintenir la solution congelée à la température de recuit pendant une durée suffisante permettant la recristallisation; surveiller les changements survenus dans la granulométrie cristalline de la glace par rapport à la durée; et déterminer la présence de protéines fonctionnelles à hystérèse thermique dans ladite solution, compte tenu de la rétention d'une granulométrie crist