METHOD FOR PURIFYING AAV

A method for purifying an adeno-associated virus, which method comprises: 1) applying a sample of impure virus to an affinity matrix under conditions to bind the adeno-associated virus to the matrix, wherein the affinity matrix comprises an affinant capable of competing with heparan sulphate for bin...

Ausführliche Beschreibung

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Hauptverfasser: ANDERSON, ROBERT, JAMES, PRENTICE, HUGH, GRANT
Format: Patent
Sprache:eng ; fre
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Beschreibung
Zusammenfassung:A method for purifying an adeno-associated virus, which method comprises: 1) applying a sample of impure virus to an affinity matrix under conditions to bind the adeno-associated virus to the matrix, wherein the affinity matrix comprises an affinant capable of competing with heparan sulphate for binding to the virus; 2) eluting contaminants from the matrix to produce a virus-rich matrix; 3) eluting virus from the virus-rich matrix; 4) treating the eluted virus with a protease incapable of digesting intact virus to digest any proteinaceous contaminants; and 5) separating intact virus from the digested proteinaceous contaminants. La présente invention concerne une technique destinée à purifier un virus associé aux adéno-virus. Cette technique consiste: (1) à appliquer un échantillon de virus impur sur une matrice d'affinités dans des conditions permettant de lier le virus associé aux adéno-virus à cette matrice. Cette matrice d'affinités comprend un affinant qui peut rivaliser avec le sulfate d'héparine pour se lier au virus, (2) à éluer les impuretés de la matrice de façon à obtenir une matrice riche en virus, (3) à éluer le virus de la matrice riche en virus, (4) à traiter ce virus élué avec une protéase incapable de digérer un virus intact de façon à digérer toutes les impuretés protéiniques, et (5) à séparer le virus intact des impuretés protéiniques digérées.