METHOD FOR DIRECTED EVOLUTION BY RANDOM CHIMERAGENESIS ON TRANSIENT TEMPLATES

A method is provided wherein at least one template is used to align oligonucleotides of interest or fragments thereof to generate chimeric polynucleotides. The oligonucleotides are allowed to hybridize to the template or templates. If necessary, unhybridized termini of hybridized oligonucleotides are removed and gaps between hybridized oligonucleotides are filled. Adjacently hybridized oligonucleotides are ligated to generate chimeric polynucleotides hybridized to the template or templates. The chimeric polynucleotides can then be subjected to selection and/or screening for desired characteristics. Prior to or concomitant with selection/screening, the template is optionally removed. Cette invention a trait à une technique dans le cadre de laquelle on utilise au moins une matrice pour aligner des oligonucléotides à étudier ou des fragments de ceux-ci et ce, afin de produire des polynucléotides chimères. On laisse ces oligonucléotides s'hybrider à une ou plusieurs matrices. Le cas échéant, les terminaux non hybridés des oligonucléotides hybridés sont retirés et les lacunes existant entre les oligonucléotides hybridés comblées. Les oligonucléotides hybridés de manière adjacente sont ligaturés de manière à produire des polynucléotides chimères hybridés à une ou à plusieurs matrices. Il est alors possible de soumettre ces polynucléotides chimères à une sélection et/ou à un criblage aux fins de la recherche de caractéristiques souhaitées. Avant cette sélection et/ou ce criblage, ou encore conjointement, on retire, éventuellement, la matrice.