METHOD FOR PRODUCING 7-AMINODESACETOXYCEPHALOSPORANIC ACID (7-ADCA)

The method is based on the utilization of desacetoxycephalosporin C (DAOC) directly produced by fermenting Acremonium chrysogenum (also called Cephalosporium acremonium) and catalyzing it by enzymatic activities D-amino acid oxydase (DAO) and glutaril-7-ACA acylase (GLA). The method for producing DAOC by fermenting A. chrysogenum is based on the inactivation of the cefEF gene and subsequent expression of the cefE gene giving rise to the A. chrysogenum DELTA cefEF-cefE. The invention also involves the following steps: (I) inactivating the A. Chrysogenum cefEF gene coding for enzymatic activities desacetoxycephalosporin C synthase (DAOCS or expandase) and desacetoxycephalosporin C synthase (DACS or hydroxylase); (II) expressing the cefE gene coding for enzymatic activity DAOCS from an actinomycete in the A. chrysogenum transformer inactivated in the cefEF gene; (III) implementing a method for fermenting the recombinant strain for the production of DAOC and (IV) enzymatic conversion of DAOC into 7-ADCA catalyzed by the DAO and GLA enzymes. Alternatively, it would be possible to directly produce 7-ADCA by fermenting A. chrysogenum through the joint expression of the genes coding for DAO and GLA in the DELTA cefEF-cefE A. chrysogenum strain producing the DAOC or through the expression of a gene coding for the acylase cephalosporin enzyme in A. chrysogenum DELTA cefEF-cefE. El procedimiento está basado en la utilización de desacetoxicefalosporina C (DAOC) producida directamente por fermentación de Acremonium chrysogenum (también denominado Cephalosporium acremonium) y catalizado por las actividades enzimáticas D-aminoácido oxidasa (DAO) y glutaril-7-ACA acilasa (GLA). El método de producción de DAOC por fermentación de A. chrysogenum está basado en la inactivación del gen cefEF y posterior expresión del gen cefE dando lugar a la cepa A. chrysogenum DELTA cefEF-cefE. La invención incluye los siguientes apartados: (I) inactivación del gen cefEF de A. Chrysogenum, el cual codifica para las actividades enzimáticas desacetoxicefalosporina C sintasa (DAOCS o expandasa) y desacetilcefalosporina C sintasa (DACS o hidroxilasa), (II) expresión del gen cefE, el cual codifica para la actividad enzimática DAOCS, procedente de un actinomiceto en el transformante de A. chrysogenum inactivado en el gen cefEF, (III) desarrollo de un método de fermentación de la cepa recombinante para la producción de DAOC y (IV) conversión enzimática de DAOC en 7-ADCA catalizada por las enzimas