METHOD FOR PRODUCING A RECOMBINANT PROTEIN

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf Verfahren zum Herstellen von rekombinanten Proteinen, insbesondere rekombinanten sekretorischen Proteinen, auf ein Verfahren zum Identifizieren von Nukleinsäuremolekülen, deren Expressionsprodukte eine verbesserte Sezernierung eines rekombinanten sekretorischen Proteins ermöglichen, auf die Verwendung von auf diese Weise identifizierten Molekülen zur Verstärkung der Sekretion von heterologen Proteinen sowie auf entsprechende Kit-Systeme. Das erfindungsgemässe Verfahren sieht die Expression einer für ein sekretorisches Protein kodierenden Nukleinsäure in einer geeigneten Wirtszelle zusammen mit einer für ein Polypeptid mit der biologischen Aktivität des eukaryontischen Translations-Initiationsfaktors 4 E und/oder einer für ein Polypeptid mit der biologischen Aktivität einer CaM-Kinase kodierenden Nukleinsäure vor. Es wurde festgestellt, dass die Coexpression des Translations-Initiationsfaktorgenes und/oder des CaM-Kinasegenes zu einer verbesserten Sezernierung eines gewünschten rekombinanten Proteins aus der Zelle führt. The invention relates to a method for producing recombinant proteins, in particular, recombinant secretory proteins, and to a method for identifying nucleic acid molecules whose expression products enable an improved secretion of a recombinant secretory protein. The invention also relates to the use of molecules identified in this manner for reinforcing the secretion of heterologous proteins and to corresponding kit systems. The inventive method provides that a nucleic acid which codes for a secretory protein is expressed in a suitable host cell together with a nucleic acid that codes for a polypeptide with the biological activity of the eukaryontic translation-initiation factor 4 E and/or with a nucleic acid that codes for a polypeptide with the biological activity of a CaM kinase. The invention also provides that the coexpression of the translation-initiation factor gene and/or of the CaM kinase gene leads to an improved secretion of a desired recombinant protein out of the cell. L'invention concerne des procédés de préparation de protéines recombinées, notamment de protéines sécrétoires recombinées, ainsi qu'un procédé permettant d'identifier des molécules d'acide nucléique, dont les produits d'expression permettent une meilleure sécrétion d'une protéine sécrétoire recombinée. L'invention concerne par ailleurs l'utilisation de molécules ainsi identifiées, pour renforcer la sécrétion de protéines