METHODS AND APPARATUS FOR DETECTING POLYNUCLEOTIDE HYBRIDIZATION

Methods and apparatus for detecting polynucleotide hybridization in luminescence-based assays. The methods may include (1) contacting a sample polynucleotide with a reference polynucleotide at an assay site, where at least one of the polynucleotides is capable of emitting luminescence, (2) illuminating the assay site with light capable of stimulating such luminescence, (3) detecting light transmitted from the assay site, and (4) deriving information relating to the extent of hybridization between the sample and reference polynucleotides based on the detected light. The methods may further include (1) illuminating with and/or detecting polarized light, (2) deriving information relating to the sequence of the sample polynucleotide from the extent of hybridization, and (3) converting the light to a signal and distinguishing between a portion of the signal attributable to luminescence and a portion attributable to background. La présente invention concerne un procédé et un dispositif de détection de l'hybridation de polynucléotides par des essais faisant intervenir la luminescence. Ce procédé peut comporter (1) une mise en contact du polynucléotide échantillon avec un polynucléotide témoin d'un site d'essai, (2) l'éclairage du site d'essai avec une lumière capable de stimuler une telle luminescence, (3) la détection de la lumière émise par le site d'essai, et (4) la déduction d'informations se rapportant à l'étendue de l'hybridation entre l'échantillon et les polynucléotides témoins sur la base de la lumière détectée. Le procédé peut en outre comporter (1) l'éclairage à la lumière polarisée et/ou la détection de cette lumière polarisée, (2) la déduction d'informations se rapportant à la séquence du polynucléotide témoin à partir de l'étendue de l'hybridation, et (3) la conversion de la lumière en un signal, puis la distinction entre une partie du signal imputable à la luminescence, et une partie imputable à l'arrière-plan.