METHOD FOR ASSESSING IN VITRO SENSITIVITY OF MALIGNANT GLIOMA CELLS TO CYTOTOXIC ACTIVITY OF CHEMOTHERAPEUTIC DRUGS

A method for assessing in vitro sensitivity of the malignant glioma cells to cytotoxic activity of chemotherapeutic drugs comprises mechanical disaggregation of glioma tissue that was surgically removed followed by washing the cells and preparing suspension in standard concentration in the nutrient medium. The cells are separated upon centrifugation in Verografin, collected at the boundary of gradient-nutrient medium, and washed in the nutrient medium. The cells are counted in Goriaev chamber. The content of the opalescent cells is calculated. The cells are cultured in test-tubes with addition of varying doses of the drug to be examined. The control is culture in nutrient medium without drug. Upon culturing, the cells are centrifuged, the supernatant is discarded, and the cell pellet is mixed with nutrient medium. Then again the total cell count and the percentage of the opalescent cells are calculated. Спосіб визначення in vitro чутливості клітин злоякісних гліом головного мозку до цитотоксичної дії хіміопрепарату включає вилучення тканини злоякісної гліоми головного мозку хворого. Потім фрагмент біоптату ріжуть лезом на невеликі частинки та механічно дезагрегують. Після цього звільнюють суспензію від крупних фрагментів. Відмивають клітини центрифугуванням у живильному середовищі. Готують суспензію клітин стандартної концентрації. Далі нашаровують верографін на суспензію клітин та центрифугують. На рівні розподілу фаз градієнт-суспензія проводять збір шару клітин відповідної щільності. Далі відмивають зібрані клітини живильним середовищем. Потім осад ресуспендують у живильному середовищі та проводять підрахунок кількості клітин. Переносять краплину цього розчину в камеру Горяєва. Підраховують кількість клітин і визначають питому вагу опалесцюючих клітин. Після суспензію розносять по пробіркам та додають живильне середовище з різними дозами хіміопрепарату. Контрольну пробу культивують у живильному середовищі та переносять у термостат. Потім центрифугують та видаляють супернатант. До осаду додають живильне середовище та перемішують. Після підраховують загальну кількість клітин та питому вагу опалесцюючих клітин.[Способ определения in vitro чувствительности клеток злокачественных глиом головного мозга к цитотоксическому действию химиопрепарата включает извлечение ткани злокачественной глиомы головного мозга больного. Фрагмент биоптата разрезают лезвием на небольшие кусочки и механически дезагрегируют. После этого освобождают суспензию от крупных фрагментов.