METHOD FOR DETERMINATION OF SPECTRUM OF DERIVATIVES OF BILIRYBIN AND BILIVERDIN IN BIOLOGICAL LIQUID

Method for determination of derivatives of bilirubin and biliverdin in biological liquids includes preparation of samples, extraction of sum of pigments from material under investigation, chromatographic distribution and spectrophotometric quantitative evaluation by means of diasoreaction. Sample taken is adsorbed on de-ashed filtering or chromatographic paper with removal of water. Extraction of general pigments is carried out with deproteinizing mix of organic solvents with addition of 5 % of carbamide, and for chromatographic distribution of components of extraction one uses combination of organic and inorganic solvents. Dyeing of chromatograms is carried out with modified diasoreagent with adding 1 % of formaldehyde and following reveal of separate fractions of derivatives of bilirubin and biliverdin at 45 °C. Spectrophotometric evaluation of separate bile pigments one carries out with direct densitometry without elution of samples from chromatograms with comparison of fractions obtained or sample to given amounts of standard of bilirubin. Способ определения производных билирубина и биливердина в биологических жидкостях включает подготовку проб, экстракцию суммы пигментов из исследуемого материала, хроматографическое распределение и спектрофотометрическую количественную оценку с помощью диазореакции. Отобранную пробу адсорбируют на обеззоленной фильтровальной или хроматографической бумаге с удалением воды. Экстракцию общих пигментов проводят депротеинизирующей смесью органических растворителей с добавлением 5 % карбамида, а для хроматографического распределения составляющих экстракта используют комбинацию органических и неорганических растворител� Спосіб визначення похідних білірубіну та білівердину в біологічних рідинах включає підготовку проб, екстракцію суми пігментів з досліджуваного матеріалу, хроматографічний розподіл і спектрофотометричну кількісну оцінку за допомогою діазореакції. Відібрану пробу адсорбують на обеззоленому фільтрувальному чи хроматографічному папері з позбавленням води. Екстракцію загальних пігментів проводять депротеїнізуючою сумішшю органічних розчинників з додаванням 5 % карбаміду, а для хроматографічного розподілу складових екстракту використовують комбінацію органічних та неорганічних розчинників. Фарбування хроматограм здійснюють модифікованим діазореактивом з додаванням 1 % мурашиного альдегіду та наступним проявленням окремих фракцій похідних білірубіну і білівердину при 45 °С. Спектрофотометричну оцінку окремих жовчних