METHOD FOR DETERMINATION OF pathogenicity FACTORS OF F.TULARENSIS STRAINS IN VITRO

A method for determination of pathogenity factors of F.tularensis strains in vitro comprises the isolation, cultivation, infection of cells of peripheral human blood and estimation of results. According to a method, leucocite pool, containing main cell types of inflammation and immune system, which was isolated from peripheral human blood, is cultivated. The cells are infected immediately after the isolation, co-cultivated with the agent during 2-24 hours, preparations are fixed and colored with different dyes, and target cells are determined. Nature and rate of cytopathic changes are determined by acceleration and enhancing of intensity of neurophile apoptosis , monocyte-macrophages destruction, and availability of mononuclear phagocytes cytoskeletons Способ определения факторов патогенности штаммов F.tularensis in vitro включает выделение, культивирование, заражение клеток периферийной крови человека и оценку результатов. Соответственно способу, культивируют выделенный из периферийной крови человека пул лейкоцитов, содержащий основные типы клеток воспаления и иммунной системы. Клетки заражают непосредственно после выделения, сокультивируют с возбудителем в течение 2-24 часов, препараты фиксируют и красят разными красителями, определяют клетки-мишени. Характер и степень цитопатических изменений устанавливают по ускорению и усилению интенсивности развития апоптоза нейтрофилов, деструкции моноцитов-макрофагов, наличия цитоскелетов мононуклеарных фагоцитов. Спосіб визначення факторів патогенності штамів F.tularensis in vitro включає виділення, культивування, зараження клітин периферійної крові людини і оцінку результатів. Відповідно до способу, культивують виділений із периферійної крові людини пул лейкоцитів, вміщуючий основні типи клітин запалення та імунної системи. Клітини заражають безпосередньо після виділення, співкультивують зі збудником протягом 2-24 годин, препарати фіксують і фарбують різними барвниками, визначають клітини-мішені. Характер і ступінь цитопатичних змін встановлюють по прискоренню і посиленню інтенсивності розвитку апоптозу нейтрофілів, деструкції моноцитів-макрофагів, наявності цитоскелетів мононуклеарних фагоцитів.