METHOD OF SPECTROPHOTOMETRIC DETERMINATION OF PROLINE IN SOLUTIONS IN THE PRESENCE OF OTHER AMINO ACIDS

The method belongs to the analytical chemistry of amino acids and can be used in research in various fields of chemistry, biotechnology, biology and food industry. For pectrophotometric determinationof proline in solutions in the presence of other amino acids, the analysed solution is incubated with a test reagent, processed at elevated temperature, cooled, dissolved the resulting chromophore and spectrophotometer. As a test reagent, ninhydrine reagent is used, and before adding to the analysed test reagent, perchloric acid is added to the final concentration of 4.1 % and withstand 20 minutes, and the resulting chromophore is dissolved in a mixture of dimethylsulfoxide-methylcellosol in a ratio of 1:1 by volume. The mixture with the resulting chromophore is inferred at the end, adding a solution of 1MNaOH, and spectrophotometer at a wavelength of 630 nm. The method can be used to analyse the products of enzymatic biosynthesis of proline, verification of the authenticity and quality of honey, juices, wine, etc. The method allows selectively determining proline in a mixture of other amino acids, while the use of highly toxic and hard-to-reach substances is minimised. Спосіб належить до аналітичної хімії амінокислот і може використовуватись у дослідженнях в різних галузях хімії, біотехнології, біології та харчової промисловості. Для спектрофотометричного визначення проліну в розчинах за присутності інших амінокислот аналізований розчин інкубують з тест-реагентом, обробляють при підвищеній температурі, охолоджують, розчиняють отриманий хромофор і спектрофотометрують. Як тест-реагент застосовують нінгідринний реактив, а перед доданням до аналізованої проби тест-реагенту додають перхлоратну кислоту до кінцевої концентрації 4,1 % і витримують 20 хвилин, причому, отриманий хромофор розчиняють у суміші диметилсульфоксид-метилцелозоль у співвідношенні 1:1 за об'ємом. Суміш з отриманим хромофором наприкінці підлужують, додаючи розчин 1 М NaOH, і спектрофотометрують при довжині хвилі 630 нм. Спосіб може бути застосований для аналізу продуктів ферментативного біосинтезу проліну, перевірки автентичності та якості меду, соків, вина та ін. Спосіб дозволяє селективно визначати пролін в суміші інших амінокислот, при цьому використання високотоксичних і важкодоступних речовин мінімізовано.