Hydrolysats de gélatine et de muscle de la raie bouclée (Raja clavata) présentant une activité hypotensive. Identification par étude peptidomique de nouveaux peptides anti-ECA

L'invention concerne des hydrolysats protéiques de gélatine et de muscle de la raie bouclée (Raja clavata) présentant une activité anti-ECA. L'activité anti-ECA a été mise en évidence dans tous les hydrolysats. Selon la présente invention, les hydrolysats de gélatine obtenus par la préparation enzymatique de B. subtilis A26 (HG-A26) et la Neutrase (HG-Neutrase) ainsi que l'hydrolysat de muscle élaboré par la préparation enzymatique de B. subti/is A26 (HM-A26) montrent les activités les plus élevées. Les hydrolysats HG-A26 et HG-Neutrase ont été fractionnés sur gel Sephadex G-25, puis les fractions les plus actives ont été sous-fractionnées par RP-HPLC. 27 et 30 peptides ont été identifiés par nanoLC-MS/MS dans les sous fractions les plus actives de HG-A26 et HG-Neutrase, respectivement. Les peptides identifiés sont riches en glycine et proline. L'hydrolysat HM-A26 a été fractionné sur gel filtration Sephadex G-25. Les deux fractions les plus actives F2 et F3 présentent des CI5o (concentration nécessaire pour inhiber 50% l'activité de l'ECA) de 0,42 et 0,51 mg/ml, respectivement. 131 et 108 peptides ont été identifiés par nanoLC-MS/MS dans les fractions F2 et F3, respectivement. Tous les peptides identifiés dérivent des différentes protéines musculaires de poissons. En tenant compte de la masse molaire des peptides identifiés et de la présence de certains acides aminés dans la séquence favorable à l'activité anti-ECA, 23 peptides ont été synthétisés chimiquement pour mettre en évidence leurs activités in vitro. Les peptides les plus actifs issus des hydrolysats de gélatine sont APGAP, GIPGAP et MRG dont les CI50 sont de l'ordre de 170,28; 27,9 et 40,8 μM, respectivement. D'autre part, les peptides issus de la même fraction exercent un effet synergique observé par diminution de la CI50. Les peptides les plus actifs issus de l 'hydrolysat de muscle sont FQPSF et LKYPI et présentent des CI50 de l'ordre de 12,56 et 27,07 μM, respectivement.