METHOD OF DETERMINATION OF CONJUGATED BILIRUBIN CONCENTRATION

FIELD: analytical biochemistry. SUBSTANCE: analyzed sample is incubated in acid medium in the presence of diazoreagent for 10 min. Then sodium azide is added (final concentration is 0.005-1.0%) to stop diazotization reaction of free bilirubin and optical density of reaction mixture in acid or alkaline medium is measured at 535 or 600 nm, respectively. Concentration of conjugated bilirubin is calculated by diazobilirubin extinction coefficient value or by comparison of measured optical density with calibration plot made with the known calibration bilirubin samples. EFFECT: simplified method due to stability of sodium azide aqueous solution. 1 dwg, 4 ex Использование: аналитическая биохимия, конкретно - клиническая биохимия. Техническая задача: упрощение известного способа. Сущность изобретения: тестируемый образец инкубируют в присутствии диазореактива в кислой среде в течение 10 мин, далее для блокирования реакции диазотирования свободного билирубина в реакционную смесь добавляют азид натрия до конечной концентрации 0,005 - 1,0% и измеряют оптическую плотность реакционной смеси в кислой или щелочной среде при длине волны 535 или 600 нм соответственно. Концентрацию конъюгированного билирубина вычисляют по коэфиценту экстинкции диазобилирубина или путем сопоставления изморенной оптической плотности с градуировочным графиком, построенным с помощью калибровочных образцов билирубина. Положительный эффект: упрощения способа за счет исключения необходимости ежедневного приготовления раствора для блокирования диазотирования свободного билирубина, так как подобранный реагент - азид натрия - устойчив в водных растворах при комнатной температуре в течение года.