STRAIN OF BACTERIUM DELEYA MARINA - A PRODUCER OF ALKALINE PHOSPHATASE AND METHOD OF ALKALINE PHOSPHATASE PREPARING

FIELD: biotechnology, enzymology. SUBSTANCE: strain of bacterium Deleya marina BKM B-2021 D is isolated from coelomic liquid of Far Eastern mollusk Crenomytilus grayanus. Strain shows high initial specific activity of alkaline phosphatase (40-45 U/mg protein). Method of alkaline phosphatase isolation involves growing strain-producer on nutrient medium, bacterial mass preparing, separation of biomass from cultural fluid followed by isolation of the end product by aqueous extraction of microbe cells and three-stage chromatography purification of crude enzyme preparation by ion-exchange, hydrophobic chromatography and gel-filtration. Specific activity of purified alkaline phosphatase is 14000-15000 U/mg protein. Enzyme can be used in medicine, genetic engineering and molecular biology. EFFECT: high specific activity of alkaline phosphatase. Изобретение относится к биотехнологии, в частности к производству ферментов, может быть использовано для получения высооактивной щелочной фосфатазы, применяемой в медицине, генной инженерии, молекулярной биологии. Штамм бактерии Deleya marina ВКМ В-2021 Д выделен из целомической жидкости дальневосточного моллюска Crenomytilus grayanus. Штамм обладает высокой исходной удельной активностью щелочной фосфатазы (40-45 ед/мг белка). Способ получения щелочной фосфатазы предусматривает выращивание штамма-продуцента на питательной среде с получением бактериальной биомассы, отделение биомассы от культуральной жидкости с последующим выделением целевого продукта водной экстракцией микробных клеток и трехстадийную хроматографическую очистку сырого ферментного препарата методами анионообменной, гидрофобной хроматографии и гель-фильтрацией. Удельная активность очищенной щелочной фосфатазы 14000-15000 ед/мг белка.