STRAIN OF HYBRID CULTURED MOUSE CELLS MUS MUSCULUS A PRODUCER OF MONOCLONAL ANTIBODIES TO R-FORMS OF VIBRIO CHOLERAE 01

FIELD: biotechnology. SUBSTANCE: invention relates to preparing hybrid cultured mammalian cells Mus musculus producing monoclonal antibodies to antigen determinant of choleraic vibrio 01. Strain is obtained by hybridization of splenocytes from white mice immunized with bacterial suspension of V. cholerae 14312 with myeloma P3-X63/Ag 8.653 and designed as C11/RO. Strain C11/RO is stored in Specialized Collection of transplanted vertebral somatic cells and shows the following characters. Cultivation medium - medium RPMI-1640 containing 10% fetal calf serum. Sowing cell dose - 100000-150000 cells/ml. Sowing coefficient is (1:4)-(1:5). Chromosome modal number - 84. Titer of monoclonal antibodies in cultural fluid - 1:400 , 1:200; in ascitic fluid - 1:128000 , 1:25000, 1:10, 1:12800. Monoclonal antibodies were referred to class Ig G. They interact with R-variant antigens of V. cholerae 01 and do not show cross reaction with typical vibrios 01 and non-01 groups, Aeromonas, Plesiomonas and representatives of families Pseudomonadaceae, Enterobacteriaceae. Monoclonal antibodies were used for diagnostic aims for serological identification of R-forms of choleraic vibrios. EFFECT: preparing hybrid strain indicated above. Изобретение относится к биотехнологии и может быть использованo для серологической идентификации R-вариантов V. cholerae 01. Целью изобретения является получение штамма гибридных культивируемых клеток животных Mus musculus, продуцирующего моноклональные антитела (МКА) к антигенной детерминанте R-ЛПС холерного вибриона 01. Штамм получают гибридизацией спленоцитов белых мышей, иммунизированных бактериальной взвесью V.cholorae 14312, с миеломой РЗ-Х63/А 8.653 и обозначают С11/RO. Штамм C11/RO хранится в Специализированной коллекции перевиваемых соматических клеток позвоночных Всероссийской коллекции клеточных культур и характеризуется следующими признаками. Среда культивирования - среда RРМ1-1640, содержащая 10% эмбриональной телячьей сыворотки. Посевная доза клеток 100 - 150 тыс/мл. Коэффициент рассева 1:4 - 1: 5. Модальное число хромосом 84. Титр МКА в культуральной жидкости 1:400 (ИФА), 1: 200 (НИФ); в асцитической - 1:128000 (ИФА), 1:25000 (НИФ), 1:10 (РИД), 1:12800 (РА). МКА относятся к kлaccу Ig G. Они взаимодействуют только с антигенами R-вариантов V. cholerae 01, не давая перекрестных реакций с типичными вибрионами 01 и не 01 групп, Aeromonas, Plesiomonas и представителями семейств Pseudomonadaceae, Enterobakeriaceae. МКА используются в диагности