CONTROLLING FORMATION OF DISULPHIDE BONDS IN PROTEIN SOLUTIONS BY ADDING REDUCING AGENTS

FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: group of inventions relates to biological production of recombinant proteins and antibodies. Disclosed are a method of controlling formation of disulphide bonds between polypeptides of a multimeric protein obtained using a biological method and a method of controlling the fraction of molecules of semi-antibodies in a solution containing a set of antibody molecules. Method comprises contacting a solution comprising polypeptides or a plurality of antibody molecules, contained in a cell-free solution, with a conditioned solution containing 2-mercaptoethylamine (2-MEA) in concentration of 0.5 mM to 2.0 mM and having pH of 4.0 to 4.8. Mixture is incubated at temperature of 2 °C to 8 °C.EFFECT: inventions provide a rapid reduction, for approximately 30 minutes, of the level of the semi-antibody and enable to effectively control the number of disulphide bonds between polypeptides of the multimeric protein and the level of semi-antibodies.9 cl, 12 dwg, 4 tbl, 15 ex Группа изобретений относится к биотехнологии и биологическому производству рекомбинантных белков и антител. Предложены способ контроля образования дисульфидных связей между полипептидами получаемого с помощью биологического способа мультимерного белка и способ контроля доли молекул полуантител в растворе, содержащем совокупность молекул антител. Приводят в контакт раствор, содержащий полипептиды или совокупность молекул антител, находящиеся в не содержащем клеток растворе, с кондиционированным раствором, включающим 2-меркаптоэтиламин (2-МЕА) в концентрации от 0,5 мМ до 2,0 мМ и имеющим рН от 4,0 до 4,8. Инкубируют смесь при температуре от 2°C до 8°C. Изобретения обеспечивают быстрое снижение, в течение примерно 30 мин, уровня полуантитела и позволяют эффективно контролировать число дисульфидных связей между полипептидами мультимерного белка и уровень полуантител. 2 н. и 7 з.п. ф-лы, 12 ил., 4 табл., 15 пр.