DIAGNOSTIC TECHNIQUE FOR PORCINE CIRCOVIRUS

FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: invention relates to the field of biotechnology and veterinary virology and represents a diagnostic technique for porcine circovirus including cell culture RK-15, infection thereof with biological material, fixation of RK-15 cells, incubation serially with specific serums and anti-wit horseradish peroxidase-labeled immunoglobulins and detecting swine circovirus antigen by presence of dark red cell cytoplasm, characterized by that RK-15 cells are fixed for 30-40 minutes in 0.01-0.02 M phosphate-salt buffer with pH 7.2-7.4 containing 1-4 % paraformaldehyde and 0.2-0.4 % nonylphenyl polyethylene glycol, at temperature of 22-24 °C, then sequentially treated for 10-15 minutes with 0.01-0.02 M phosphate-salt buffer with pH 7.2-7.4, containing 0.3-0.4 M glycine and 1-2 % casein, followed by 10-15 minutes 0.3-0.6 % hydrogen peroxide, after which specific polyclonal antibodies are applied.EFFECT: use of the declared method enables rapid and accurate diagnosis of porcine circovirus.1 cl, 11 ex Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной вирусологии и представляет собой способ диагностики цирковируса свиней, включающий посев культуры клеток РК-15, инфицирование ее биологическим материалом, фиксацию клеток РК-15, инкубирование последовательно со специфическими сыворотками и антисвиными меченными пероксидазой хрена иммуноглобулинами и выявление антигена цирковируса свиней по наличию темно-красного окрашивания цитоплазмы клеток, отличающийся тем, что фиксацию клеток РК-15 проводят в течение 30-40 минут в 0,01-0,02 М фосфатно-солевом буфере с рН 7,2-7,4, содержащем 1-4% параформальдегида и 0,2-0,4% нонилфенилполиэтиленгликоля, при температуре 22-24°С, затем обрабатывают последовательно 10-15 минут 0,01-0,02 М фосфатно-солевым буфером с рН 7,2-7,4, содержащим 0,3-0,4 М глицина и 1-2% казеина, затем 10-15 минут 0,3-0,6%-ной перекисью водорода, после чего наносят специфические поликлональные антитела. Использование заявленного способа позволяет быстроту и точность диагностики цирковируса свиней. 1 з.п. ф-лы, 11 пр.