METHOD FOR EXTRACTING AND PURIFYING RECOMBINANT PROTEIN, AN ANALOGUE OF A HUMAN KAPPA-CASEIN FRAGMENT HAVING CYTOTOXIC ACTIVITY TOWARDS HUMAN CANCER CELLS

FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: invention relates to biotechnology, genetic and protein engineering. Method for extraction and purification of recombinant protein, analogue of human kappa-casein fragment, involves cultivation of HEK293T-producing cells expressing recombinant EL1 protein, concentration and purification of the culture medium first using cation-exchange chromatography on SP-sepharose, and then using nickel-affinity chromatography on IMAC-sepharose, successive elution from impurity proteins and target product sorbents using a system of eight buffer solutions and subsequent purification of the end product by dialysis against 150 mM NaCl.EFFECT: invention increases specific activity and purity of the end product.1 cl, 7 dwg, 4 ex Изобретение относится к биотехнологии, генетической и белковой инженерии. Способ выделения и очистки рекомбинантного белка, аналога фрагмента каппа-казеина человека, включает культивирование клеток-продуцентов НЕК293Т, экспрессирующих рекомбинантный белок EL1, концентрирование и очистку культуральной среды сначала с помощью катионообменной хроматографии на SP-сефарозе, а затем с помощью никель-аффинной хроматографии на IMAC-сефарозе, осуществление последовательной элюции с сорбентов примесных белков и целевого продукта с использованием системы из восьми буферных растворов и последующую очистку целевого продукта диализом против 150 мМ NaCl. Изобретение позволяет повысить специфическую активность и чистоту целевого продукта. 7 ил., 4 пр.