METHOD FOR PRODUCING ANTIGEN FROM MYCOBACTERIUM BOVIS BOVINUS-8 STRAIN 700201 WITH MOLECULAR WEIGHT OF 28 kDa FOR STUDYING HUMORAL IMMUNE RESPONSE

FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: invention represents a method for obtaining an antigen from Mycobacterium bovis Bovinus-8 strain 700201 with molecular weight of 28 kDa for studying the humoral immune response, involving cultivation of an agent on a solid nutrient medium of Levenshtein-Jensen medium, destruction of washed cells and fractionation by preparative electrophoresis, where washed cells are subjected to destruction three times in homogenizer Fast Prep 24 for 45 sec at vibration rate of 6.5 ms, destructed cells are removed by centrifugation at 7,000 rpm, maintained supernatant at +4-6 °C for 10 days, repeatedly removing spontaneous sediment by centrifugation, adding to supernatant lysing buffer containing 0.2 % sodium dodecyl sulphate, 0.1 % 2-β mercaptoethanol, samples are held at 100 °C from 10 minutes, fractionated on column using 9 % polyacryamide gel.EFFECT: invention enables to obtain an antigen having high specificity and activity.1 cl, 5 dwg Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения антигена из Mycobacterium bovis Bovinus-8 штамм 700201 молекулярной массой 28 кДа для изучения гуморального иммунного ответа, включающий культивирование возбудителя на твердой питательной среде среде Левенштейна-Йенсена, разрушение отмытых клеток и фракционирование препаративным электрофорезом, где отмытые клетки трижды подвергают разрушению в гомогенизаторе Fast Prep 24 в течение 45 сек при скорости вибрации 6,5 мс, удаляют разрушенные клеток с помощью центрифугирования при 7000 об/мин, выдерживают супернатант при +4-6°С в течение 10 дней, повторно удаляют спонтанный осадок центрифугированием, добавляют к супернатанту лизирующий буфер, содержащий 0,2% додецилсульфата натрия, 0,1% 2-β меркаптоэтанола, выдерживают пробы при 100°С 10 минут, фракционируют на колонке, с использованием 9% полиакриамидного геля. Изобретение позволяет получить антиген обладающий высокой специфичностью и активностью. 5 ил.