SET OF REACTIVES FOR IDENTIFICATION OF Ph-NEGATIVE MYELOPROLIFERATIVE BLASTOMA AND A METHOD OF DIAGNOSTICS BASED ON IT

FIELD: medicine.SUBSTANCE: group of inventions relates to medicine, namely to oncology, and can be used to diagnose the detection of Ph-negative myeloproliferative blastoma. A set containing specific primers and fluorescence-labelled DNA probes is proposed. Primers have the following nucleotide composition (5'-3'-): JAK2-W-F, JAK2-W-R, JAK2-W-P, JAK2-M-F, JAK2-M-R, JAK2-M-P, CALR-l-F, CALR-l-R, MPL-K-F, MPL-K-R, CALR-1-P, MPL-K-P, CALR-2-F, CALR-2-R, MPL-L-F, MPL-L-R, CALR-2-P, MPL-L-P. In TaqMan probes on 5' end dyes are used: fluorescein (FAM) and chlorinated fluorescein (HEX). For extinction of fluorescence, Black Hole Quencher-1 (BHQ1) on 3' end is used. Also a diagnostic method of Ph-negative myeloproliferative blastoma is proposed, including a conduction of a real-time polymerase chain reaction.EFFECT: group of inventions allows the simultaneous study of several mutations in one analytical series, which leads to the result in a shorter period of time; and also provides an accurate diagnosis of chronic Ph-negative myeloproliferative blastoma, allows to identify a group of patients with the presence of combined pathogenetic mutations.2 cl, 3 dwg, 3 tbl, 1 ex Группа изобретений относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использована для диагностики выявления Ph-негативных миелопролиферативных новообразований. Предложен набор, содержащий специфичные праймеры и флуоресцентно-меченые ДНК-зонды. Праймеры имеют следующий нуклеотидный состав (5'-3'-): JAK2-W-F, JAK2-W-R, JAK2-W-P, JAK2-M-F, JAK2-M-R, JAK2-M-P, CALR-l-F, CALR-l-R, MPL-K-F, MPL-K-R, CALR-1-P, MPL-K-P, CALR-2-F, CALR-2-R, MPL-L-F, MPL-L-R, CALR-2-P, MPL-L-P. В TaqMan зондах на 5' конце применяют красители: флуоресцеин (FAM) и хлорированный флуоресцеин (HEX). Для тушения флуоресценции используют Black Hole Quencher-1 (BHQ1) на 3' конце. Также предложен способ диагностики Ph-негативных миелопролиферативных новообразований, включающий проведение полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Группа изобретений позволяет проводить одновременное исследование нескольких мутаций в одной аналитической серии, что приводит к результату в более короткие сроки. А также обеспечивает точную диагностику хронических Ph-негативных миелопролиферативных опухолей, позволяет выявлять группу пациентов с наличием сочетанных патогенетических мутаций. 2 н.п. ф-лы, 3 ил., 3 табл., 1 пр.