METHOD OF DNA AMPLIFICATION ON BASIS OF INCORPORATION INTO CHAIN

FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: invention relates to biotechnology. Method for detecting toxicogenic Clostridium difficile (C. difficile) is proposed by amplifying DNA on the basis of incorporation into a chain, together with oligonucleotides, compositions and kits suitable for use in the present method. Method comprises bringing said sample into contact with at least one forward primer, at least one reverse primer and at least one chain-embedded oligonucleotide under conditions conducive to amplification of said target nucleotide sequence. Said primer and said chain-integrating oligonucleotide comprises a region complementary to said target nucleotide sequence. This chain-integrating oligonucleotide converts at least a portion of the target nucleotide sequence to a single-stranded state, that allows contacting said direct primer and a reverse primer.EFFECT: ensuring high specificity and sensitivity of the method for detecting different target sequences of toxicogenic Clostridium difficile.19 cl, 4 dwg, 6 ex Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ обнаружения токсикогенной Clostridium difficile (C. difficile) путем амплификации ДНК на основе внедрения в цепь вместе с олигонуклеотидами, композициями и наборами, подходящими для применения в настоящем способе. Способ включает приведение указанного образца в контакт с по меньшей мере одним прямым праймером, по меньшей мере одним обратным праймером и по меньшей мере одним внедряющимся в цепь олигонуклеотидом в условиях, способствующих амплификации указанной целевой нуклеотидной последовательности. Указанный праймер и указанный внедряющийся в цепь олигонуклеотид содержит участок, комплементарный указанной целевой нуклеотидной последовательности. Указанный внедряющийся в цепь олигонуклеотид переводит по меньшей мере часть целевой нуклеотидной последовательности в одноцепочечное состояние, что позволяет связаться указанным прямому праймеру и обратному праймеру. Техническим результатом настоящего изобретения является обеспечение высокой специфичности и чувствительности способа обнаружения различных целевых последовательностей токсикогенной С. difficile. 8 н. и 11 з.п. ф-лы, 4 ил., 6 пр.