RECOMBINANT STRAIN OF VV-GMCSF-S-Lact VACCINIA VIRUS, WITH ONCOLYTIC ACTIVITY, PRODUCING GRANULOCYTOR-MACROPHAGAL COLONY-STIMULATING HUMAN FACTOR AND SECRETED FORM OF LACTAPTIN ONCOTOXIC PROTEIN

FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: characterised recombinant strain VV-GMCSF-S-Lact is constructed on the basis of the vaccinia virus L-IVP strain, containing deletions of fragments of viral thymidine kinase and growth factor genes with integrated granulocyte-macrophagal colony-stimulating factor (GM-CSF) with structure corresponding to human GM-CSF matrix RNA cDNA in the central part of the viral thymidine kinase gene; and the secreted S-Lact lactaptin gene, encoding a human cappase-casein fragment of 23-134 a.o. with "stitching" to its N-terminus of the GM-CSF signal peptide (MWLQSLLLLGTVACSIS), in the left end region of the viral genome. The human GM-CSF gene is expressed under the control of the natural promoter P7.5k of the vaccinia virus and produces the secreted form of a biologically active human GM-CSF in mammalian cells. The S-Lact gene is expressed under the control of the synthetic VACV promoter P7.5synth and produces the secreted oncotoxic protein lactaptin.EFFECT: strain has targeted oncolytic activity against human breast cancer cells in vitro and in vivo and is deposited in SVC of viral infections pathogens and rickettsiosis of FBIS SSC VB Vector under the number V-690.6 dwg, 1 tbl, 5 ex Изобретение относится к рекомбинантному штамму вируса осповакцины (VACV). Охарактеризованный рекомбинантный штамм VV-GMCSF-S-Lact сконструирован на основе штамма Л-ИВП вируса осповакцины, содержащего делеции фрагментов генов вирусной тимидинкиназы и ростового фактора, в районы которых встроены: ген гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ) человека, структура которого соответствует кДНК матричной РНК ГМ-КСФ человека, в центральной части гена вирусной тимидинкиназы; и ген секретируемого лактаптина S-Lact, кодирующий фрагмент каппа-казеина человека 23-134 а.о. с «пришивкой» к его N-концу сигнального пептида ГМ-КСФ (MWLQSLLLLGTVACSIS), в левом концевом районе вирусного генома. Ген ГМ-КСФ человека экспрессируется под контролем природного промотора P7.5k вируса осповакцины и продуцирует секретируемую форму биологически активного ГМ-КСФ человека в клетках млекопитающих. Ген S-Lact экспрессируется под контролем синтетического промотора VACV Р7.5synth и продуцирует секретируемый онкотоксический белок лактаптин. Представленный штамм обладает адресной онколитической активностью в отношении клеток рака молочной железы человекаии депонирован в ГКВ возбудителей вирусных инфекций и риккетсиозов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» под номером V-690. 6 ил., 1 таб