RECOMBINANT PLASMID pDUALREP2 DNA AND STRAIN TRANSFORMED THEREBY FOR DETECTION OF SUBSTANCES AND MIXTURES, INHIBITING PROTEINS BIOSYNTHESIS AND/OR SOS-RESPONSE INDUCTION IN BACTERIA
FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: genetic structure contains genes of two fluorescent proteins with distinct fluorescence spectra. Expression of one fluorescent protein gene is activated by stopped translation of the preceding genetically modified Escherichia coli tryptophan operon attenuator. Express...
Gespeichert in:
Hauptverfasser: | , , , , , , , , , , |
---|---|
Format: | Patent |
Sprache: | eng ; rus |
Schlagworte: | |
Online-Zugang: | Volltext bestellen |
Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
Zusammenfassung: | FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: genetic structure contains genes of two fluorescent proteins with distinct fluorescence spectra. Expression of one fluorescent protein gene is activated by stopped translation of the preceding genetically modified Escherichia coli tryptophan operon attenuator. Expression of the second gene is activated by de-repression of the preceding Escherichia coli sulA gene promoter. The genetic structure is a plasmid, transforming E. coli bacterial cells to obtain the E. coli tolC Δreporter strain.EFFECT: obtained strain allows efficient analysis of a large number of substances or mixtures to find antibacterial agents, while identifying those that inhibit protein biosynthesis or induce SOS-response to DNA damage.5 cl, 5 dwg, 1 tbl, 3 ex
Изобретение относится к биотехнологии, конкретно к методам поиска антибактериальных веществ природного и синтетического происхождения с одновременным анализом механизма их действия, и может быть использовано для идентификации соединений, ингибирующих биосинтез белка и/или вызывающих SOS-ответ у бактерий. Генетическая конструкция содержит гены двух флюоресцентных белков с различимыми спектрами флюоресценции. Экспрессия одного из генов флюоресцентных белков активируется при остановке трансляции предшествующего ему генетически модифицированного аттенюатора триптофанового оперона Escherichia coli. Экспрессия второго гена активируется при дерепрессии предшествующего ему промотора гена sulA Escherichia coli. Генетическая конструкция представляет собой плазмиду, которой трансформируют клетки бактерий Е. coli для получения штамма-репортера Е. coli ΔtolC. Полученный штамм Е. coli ΔtolC позволяет проводить высокопроизводительный анализ (скрининг) большого количества веществ или смесей для поиска среди них антибактериальных веществ, с одновременным выявлением тех из них, которые ингибируют биосинтез белка и/или вызывают SOS-ответ на повреждения ДНК. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 5 ил., 1 табл., 3 пр. |
---|