METHOD OF PRODUCING HEPARIN

FIELD: chemistry.SUBSTANCE: method of producing heparin involves thawing and homogenisation of raw material, filling with 0.6M sodium chloride solution, adding alcalase to a final concentration of 0.1-0.5%. Pigs' frozen mucous membrane of the small intestine (mucosa) with a shelf life of no more than 6 months at -20°C is used as raw material. Enzymatic hydrolysis is being performed at 65°C and pH 8.5-8.6 for 6 hours, then the enzyme is being inactivated at 90°C for 15 minutes. The produced hydrolyzate is cooled to temperature of 15-20°C and centrifuged. Concentrated hydrochloric acid is added to supernatant fluid to pH 3.0, heated to 70°C and being held for 30 minutes for additional hydrolyzate decontamination of protein origin ballast substances. The resulting residue is removed by way of centrifugation. Thereafter, end product sorption is performed in dynamic mode from the supernatant fluid on anion exchanger YMC-BioPro Q75. Anion exchanger is pre-equilibrated by 0.6M sodium chloride solution. After the sorption is complteted the anion exchanger is washed with 0.6M sodium chloride solution, ballast substances are removed from the anion exchanger with 0.9 M sodium chloride solution, heparin is desorbed from the anion exchanger with1.4 M sodium chloride solution.EFFECT: invention increases output of heparin, its specific activity, reduces the technology process.1 cl, 5 ex Способ получения гепарина предусматривает размораживание и гомогенизацию сырья, заливку 0,6 М раствором натрия хлорида, добавление алкалазы до конечной концентрации 0,1-0,5%. В качестве сырья используют замороженную слизистую оболочку тонкого кишечника (мукозу) свиней со сроком хранения не более 6 месяцев при -20ºС. Ведут ферментативный гидролиз при температуре 65°С и рН 8,5-8,6 в течение 6 часов, затем фермент инактивируют при температуре 90°С в течение 15 минут. Полученный гидролизат охлаждают до температуры 15-20°С и центрифугируют. Для дополнительной очистки гидролизата от балластных веществ белковой природы к надосадочной жидкости добавляют концентрированную соляную кислоту до рН 3,0, нагревают до температуры 70°С и выдерживают в течение 30 минут. Образовавшийся осадок удаляют центрифугированием. После этого ведут сорбцию целевого продукта в динамическом режиме из надосадочной жидкости на анионите YMC-BioPro Q75. Анионит предварительно уравновешивают 0,6 М раствором натрия хлорида. После завершения сорбции анионит промывают 0,6 М раствором натрия хлорида, удаляют балластные вещества