METHODS OF CONJUGATION

FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: present invention relates to biotechnology. Disclosed is a method of preparing a purified conjugate in a solution, involving bringing into contact a maytansinoid molecule containing a thiol group, with a heterobifunctional linker reagent for covalent bonding of linker to maytansinoid molecule, then conjugation of antibody with maytansinoid molecule associated with linkers, by reacting obtained crude mixture with antibody in a solution having pH from approximately 4 to approximately 9, and applying to produced mixture tangential flow filtration, dialysis, gel filtration, adsorption chromatography, selective deposition or combination thereof to produce purified conjugate.EFFECT: disclosed method requires no purification of intermediate compounds, provides high output of conjugates of high purity and homogeneity without inter-chain crosslinking and inactivated residues of linker and can find further application in production of medicinal preparations based on corresponding conjugates.9 cl, 25 dwg, 1 tbl, 8 ex Настоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ приготовления очищенного конъюгата в растворе, включающий приведения в контакт майтансиноидной молекулы, содержащей тиоловую группу, с гетеробифункциональным линкерным реагентом для ковалентного присоединения линкера к майтансиноидной молекуле, затем конъюгацию антитела с майтансиноидной молекулой, связанной с линкерами, путем реакции полученной неочищенной смеси с антителом в растворе, имеющем рН от примерно 4 до примерно 9, и применение к полученной смеси тангенциальной поточной фильтрации, диализа, гелевой фильтрации, адсорбционной хроматографии, селективного осаждения или их комбинации для получения очищенного конъюгата. Способ по настоящему изобретению не требует проведения очистки промежуточных соединений, дает высокий выход конъюгатов высокой чистоты и гомогенности без межцепочечных поперечных сшивок и инактивированных остатков линкера и может найти дальнейшее применение в получении лекарственных препаратов на основе соответствующих конъюгатов. 8 з.п. ф-лы, 25 ил., 1 табл., 8 пр.