RECOMBINANT PLASMID DNA pET22b(+)/slurp-2 CODING SLURP-2 PROTEIN, AND STRAIN OF BACTERIA Escherichia coli BL21(DE3) pET22b(+)/slurp-2 PRODUCER OF HUMAN SLURP-2 PROTEIN

FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: invention relates to biotechnology, particularly to recombinant production of human proteins, and can be used for production of human SLURP-2 protein. Constructed plasmid DNA pET22b(+)/slurp-2 coding human protein SLURP-2 of 5616 p.a. with physical map presented on fig. 1, which consists of NdeI/HindIII fragment of plasmid DNA pET22b(+) length of 5382 p.a. containing lac-promoter E.coli, gene bla β-lactamase, gene fragment lacI E. coli, section of replication initiation origins and artificial DNA sequence coding NdeI/HindIII fragment length 240 p. representing sequence of synthetic protein gene of human SLURP-2 with SEQ ID NO:7, and has unique recognition sites restricting endonucleases, having following coordinates: XhoI - 158, HindIII - 173, EcoRI - 192, BamHI - 198, NdeI - 430, BglII - 534, MluI - 1256, PstI - 4495. Produced plasmid is used to transform competent cells of E.coli BL21 (DE3) to produce bacterial strain E.coli BL21(DE3)/pet22b(+)/slurp-2, producer of human protein SLURP-2.EFFECT: invention enables higher effectiveness of SLURP-2 protein synthesis in Escherichia coli.2 cl, 4 dwg, 6 ex Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к рекомбинантной продукции белков человека, и может быть использовано для получения белка SLURP-2 человека. Конструируют плазмидную ДНК pET22b(+)/slurp-2, кодирующую белок SLURP-2 человека 5616 п. о. с физической картой, представленной на фиг.1, которая состоит из NdeI/HindIII - фрагмента ДНК плазмиды pET22b(+) длиной 5382 п. о., содержащего lac-промотор Е. coli, ген bla β-лактамазы, фрагмент гена lacI Е. coli, участок ori инициации репликации и искусственную последовательность ДНК, кодирующую NdeI/HindIII фрагмент длиной 240 п. о., представляющий собой последовательность синтетического гена белка человека SLURP-2 с SEQ ID NO:7; и содержит уникальные сайты узнавания рестрикционными эндонуклеазами, имеющие следующие координаты: XhoI - 158, HindIII - 173, EcoRI - 192, BamHI - 198, NdeI - 430, BglII - 534, MluI - 1256, PstI - 4495. Полученной плазмидой трансформируют компетентные клетки E. coli BL21(DE3) с получением штамма бактерий E.coli BL21(DE3)/pET22b(+)/slurp-2 - продуцента белка SLURP-2 человека. Изобретение позволяет повысить эффективность синтеза белка SLURP-2 в Escherichia coli. 2 н.п. ф-лы, 4 ил., 6 пр.