EVALUATION METHOD OF MORPHOFUNCTIONAL STATE OF INDUCED PLURIPOTENT STEM CELLS OF PARKINSONIAN PATIENTS, WHICH ARE DIFFERENTIATED TO DOPAMINERGIC NEURONS

FIELD: biotechnologies.SUBSTANCE: invention proposes an evaluation method of morphofunctional state of induced pluripotent stem cells (IPSC) of parkinsonian patients by their differentiation to dopaminergic neurons; for that purpose, factors act on IPSC, which induce their differentiation to dopaminergic neurons, and then, they are put on a multiple electrode matrix treated with matrigel/fibronectin reference substrate; after that, starting from the 3-rd day to the 5-th day up to the 8-th day to the 10-th day there performed is dynamic recording of online spontaneous bioelectrical activity, and by the 3-rd day to the 5-th day of online spontaneous bioelectrical activity in the form of single spikes, and by the 8-th day to the 10-th day of organised clustered spike activity on a monolayer formed on microelectrodes, morphofunctional state is evaluated as neuronal directivity of differentiation of IPSC to dopaminergic neurons.EFFECT: invention can be used for characteristic of reprogrammed cell lines of parkinsonian patients and check of their ability to be differentiated to a certain phenotype of neurons for the purpose of transplantology and at testing of remedies.4 dwg, 1 ex Изобретение относится к области биотехнологии и медицины. Предложен способ оценки морфофункционального состояния индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (ИПСК) больных паркинсонизмом путем проведения их дифференцировки в дофаминергические нейроны, для чего воздействуют на ИПСК факторами, индуцирующими их дифференцировку в дофаминергические нейроны, а затем высаживают их на мультиэлектродную матрицу, обработанную опорным субстратом матригель/фибронектин, после чего, начиная с 3-5 дня вплоть до 8-10 дня, проводят динамическую регистрацию сетевой спонтанной биоэлектрической активности и при наличие к 3-5 дню сетевой спонтанной биоэлектрической активности в виде одиночных спайков, а к 8-10 дню упорядоченной пачечной спайковой активности на сформированном на микроэлектродах монослое оценивают морфофункциональное состояние как нейрональную направленность дифференцировки ИПСК в дофаминергические нейроны. Изобретение может быть использовано для характеристики репрограммированных клеточных линий больных паркинсонизмом и проверки их способности дифференцироваться в определенный фенотип нейронов в целях транспланталогии и при тестировании лекарств. 1 з.п. ф-лы, 4 ил, 1 пр.