METHOD FOR DETERMINING LIPOLYTIC ACTIVITY IN SUBCELLULAR FRACTIONS OF BACTERIA

FIELD: biotechnologies.SUBSTANCE: medium contains agarose or agar (500 mg), non-ionic detergent (50 mcl), calcium chloride (12.5 mg), 0.05 M Tris-HCl buffer pH 8.3 (up to 100 ml); with that, after medium is hardened, pits are made in it, into which the tested specimen is introduced in the volume of 10-50 mcl per pit; then, medium with the tested specimen is incubated at 37°C during 12 hours and presence or absence of lipolytic activity in the tested specimen is visually determined. At availability of lipolytic activity there observed are mat coronae around the pit; when lipolytic activity is absent, medium around the pit remains clear.EFFECT: use of the proposed method allows easy, available and economic determination of lipolytic activity of subcellular fractions of bacteria.4 cl, 6 ex Изобретение относится к области биохимии и микробиологии и может быть использовано для определения липолитической активности в субклеточных фракциях бактерий. Сущность способа состоит в том, что среда, содержит агарозу или агар (500 мг), неионный детергент (50 мкл), хлористый кальций (12,5 мг), 0,05 М Трис-HCl буфер pH 8,3 (до 100 мл), причем после застывания среды в ней делают лунки, в которые вносят исследуемый образец в объеме 10-50 мкл на одну лунку, затем среду с исследуемым образцом инкубируют при 37°C в течение 12 часов и визуально определяют наличие или отсутствие липолитической активности в исследуемом образце. При наличии липолитической активности наблюдают матовые ореолы вокруг лунки, при отсутствии липолитической активности среда вокруг лунки остается прозрачной. Использование заявленного способа позволяет просто, доступно и экономично определить липолитическую активность субклеточных фракций бактерий. 3 з.п. ф-лы, 6 пр.