VECTOR PLASMIDS FOR CLONING DNA MODULES AND METHODS OF THEIR USE

FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: vector plasmids ("docking vectors") are proposed for the synthesis of transgenes (RES), which represent a cloning vector, which is included in the cloning module consisting of four gene joints (GJ 1-4) and three nucleotide sequences (NS 1-3) located between them, where each of GJ comprises from 2 to 4 non-variable rare restriction sites from more than 6 nucleotides, and the nucleotide sequences between GJ include "inserts" which while cloning are replaced in the NS 1 by the promoter module, in the NS 2 by expression module and in NS 3 by 3'-regulatory module. At that, either GJ 1 or GJ 2 independently contain 3-4 non-variable rare restriction sites of more than 6 nucleotides. According to the invention, the variation of connection vector RES is also proposed which is designed for the multiple cloning (MC), and characterised in that at least one of the three NS is the module of multiple cloning with a site of multiple cloning comprising common restriction sites which are unique in the docking vector RES.EFFECT: improvement of the method.6 cl, 21 dwg Изобретение относится к области генной инженерии и может быть использовано в биотехнологических процессах в качестве средства для объединения фрагментов ДНК и получения сложных ДНК-конструкций. Предложены векторные плазмиды («стыковочные векторы») для синтеза трансгенов (РЕ3), представляющие собой клонирующий вектор, в который включен модуль клонирования, состоящий из четырех генных шарниров (ГШ 1-4) и расположенных между ними трех нуклеотидных последовательностей (НП 1-3), где каждый из ГШ содержит от 2 до 4 невариабельных редких сайтов рестрикции из более чем 6 нуклеотидов, а нуклеотидные последовательности между ГШ включают «вкладыши», которые при клонировании заменяются в НП 1 - модулем промотора; в НП 2 - модулем экспрессии, а в НП 3 - 3'-регуляторным модулем. При этом либо ГШ 1, либо ГШ 2 независимо содержат 3-4 невариабельных редких сайта рестрикции более чем из 6 нуклеотидов. Предлагается также вариация стыковочного вектора РЕ3 по изобретению, предназначенная для множественного клонирования (МС) и отличающаяся тем, что, по меньшей мере, одна из трех НП является модулем множественного клонирования с сайтом множественного клонирования, включающим распространенные сайты рестрикции, которые являются уникальными в стыковочном векторе РЕ3. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 21 ил.