EXPRESSION VECTOR FOR TRANSGENIC INTRODUCTION INTO CELLS AND TISSUES OF MAMMALS WITH REGULATED NON-VIRAL PROMOTOR
FIELD: biotechnologies.SUBSTANCE: proposed vector is designed on the basis of a vector plasmid pEGFP-Nl, containing a DNA fragment, which codes a promotor of a heat shock protein gene hsp70 Drosophila melanogaster and a regular sequence upstream, containing heat shock elements (HSE) in different qua...
Gespeichert in:
Hauptverfasser: | , , , , |
---|---|
Format: | Patent |
Sprache: | eng ; rus |
Schlagworte: | |
Online-Zugang: | Volltext bestellen |
Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
Zusammenfassung: | FIELD: biotechnologies.SUBSTANCE: proposed vector is designed on the basis of a vector plasmid pEGFP-Nl, containing a DNA fragment, which codes a promotor of a heat shock protein gene hsp70 Drosophila melanogaster and a regular sequence upstream, containing heat shock elements (HSE) in different quantities, a polylinker zone, a gene of green fluorescent protein (GFP) and a gene of stability to neomycin, at the same time the promotor is capable of activation under action of temperature of heat shock of mammals or under toxic effect. Such vector is activated as temperature increases to 38°C or in case of toxic impact at transgenic cells or tissue of mammals. Activity of a promotor within the vector may be regulated, i.e. it is possible to cause either its hyperactivity or its weak leak, or to block activity of this promotor by saturation of the regulatory area with HSE elements.EFFECT: invention may be used to produce transgenic preparations, where an investigated or used gene will be under control of a regulated non-viral promotor.3 cl, 20 dwg, 2 ex
Изобретение относится к области молекулярной генетики и клеточной биологии и касается вектора экспрессии для трансгенного введения в клетки и ткани млекопитающих. Представленный вектор сконструирован на основе векторной плазмиды pEGFP-N1, содержащий фрагмент ДНК, кодирующий промотор гена белка теплового шока hsp70 Drosophila melanogaster и регуляторную последовательность перед ним, содержащую элементы теплового шока (HSE) в различном количестве, зону полилинкера, ген зеленого флуоресцентного белка (GFP) и ген устойчивости к неомицину, при этом промотор способен активироваться под действием температуры теплового шока млекопитающих или при токсическом воздействии. Такой вектор активируется при повышении температуры до 38°С или токсическом воздействии на трансгенные клетки или ткань млекопитающих. Активность входящего в состав вектора промотора можно регулировать, то есть можно вызвать или его гиперактивность, или его слабое «подтекание» или блокировать активность данного промотора путем насыщения регуляторной области элементами HSE. Изобретение может быть использовано для получения трансгенных препаратов, где исследуемый или используемый ген будет находиться под контролем регулируемого невирусного промотора. 2 з.п. ф-лы, 20 ил., 2 пр. |
---|