RECOMBINANT PLASMID pAd-SM, CODING HUMAN PROTEINS SOX2 AND C-MYC, BEING BASE FOR PRODUCTION OF VIRULENT ADENOVIRUSES DESIGNED FOR PRODUCTION OF INDUCED PLURIPOTENT HUMAN CELLS

FIELD: biotechnologies.SUBSTANCE: genetic structure pAd-SM is produced, being built by homological recombination of the vector pAdEasy-1, containing the main part of genome of adenovirus and plasmid pAdTrack-CMV, where cDNA fragments of human genes SOX2 and C-MYC are placed, being connected with a nucleotide sequence that codes P2A-peptide. The plasmid pAd-SM produced as a result of homological recombination contains a fragment SOX2-P2A-C-MYC under control of a constitutive promotor CMV.EFFECT: possibility to produce adenovirus particles for simultaneois delivery of genes and expression of proteins SOX2 and C-MYC in human cells, pAd-SM contains a gene that codes a fluorescent protein EGFP, under control of a CMV promotor, which makes it possible to track transduction of cells and elimination of virus DNA from a cell.3 cl, 1 dwg Изобретение относится к области генной инженерии, молекулярной и клеточной биологии и биотехнологии. Получена генетическая конструкция pAd-SM, построенная путем гомологичной рекомбинации вектора pAdEasy-1, содержащего основную часть генома аденовируса и плазмиды pAdTrack-CMV, в которую помещены фрагменты кДНК генов SOX2 и C-MYC человека, соединенные нуклеотидной последовательностью, кодирующей Р2А-пептид. Полученная в результате гомологичной рекомбинации плазмида pAd-SM содержит фрагмент SOX2-P2A-C-MYC под контролем конститутивного промотора CMV, что позволяет получать аденовирусные частицы для одновременной доставки генов и экспрессии белков SOX2 и С-MYC в клетках человека. Кроме того, pAd-SM содержит ген, кодирующий флуоресцентный белок EGFP, под контролем промотора CMV, что позволяет отслеживать трансдукцию клеток и элиминацию вирусной ДНК из клетки. Изобретение может быть использовано для получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека в клеточной биологии и медицине. 2 з.п. ф-лы, 1 ил.