RECOMBINANT PLASMID pOK-DsRed2, CODING OCT4 AND KLF4 HUMAN PROTEINS AND FLUORESCENT PROTEIN DsRed2, DESIGNED TO PRODUCE INDUCED PLURIPOTENT HUMAN STEM CELLS

FIELD: biotechnologies.SUBSTANCE: plasmid genetic structure pOK-DsRed2 is produced, being built on the basis of a plasmid vector pIRES (Clontech), where fragments of cDNA of human genes OCT4 and KLF4 are placed, being connected with a nucleotide sequence coding P2A-peptide and gene cDNA, coding fluorescent protein DsRed2. Transcription of a single mRNA OCT4-F2A-KLF4-IRES-DsRed2 is carried out from constitutive promotor p CMV IE, providing for high level of mRNA lifelength.EFFECT: availability of F2A and IRES sequences makes it possible to simultaneously translate proteins OCT4, KLF4 and DsRed2 from one mRNA molecule.2 cl, 1 dwg, 1 tbl Изобретение относится к области генной инженерии, молекулярной и клеточной биологии, биотехнологии. Получена плазмидная генетическая конструкция pOK-DsRed2, построенная на основе плазмидного вектора pIRES (Clontech), в который помещены фрагменты кДНК генов ОСТ4 и KLF4 человека, соединенные нуклеотидной последовательностью, кодирующей F2А-пептид и кДНК гена, кодирующего флуоресцентный белок DsRed2. Транскрипция единой мРНК OCT4-F2A-KLF4-IRES-DsRed2 осуществляется с конститутивного промотора р CMV IE, обеспечивающего высокий уровень наработки мРНК. Наличие последовательностей F2A и IRES позволяет одновременно транслировать белки ОСТ4, KLF4 и DsRed2 с одной молекулы мРНК. Изобретение может быть использовано для получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека. 2 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 табл.