METHOD FOR PRODUCING BRUCELLOUS L-ANTIGEN

FIELD: medicine, pharmaceutics.SUBSTANCE: invention refers to veterinary microbiology, immunology, biotechnology, namely to technology of an antigen for diagnosing brucellosis. The method for producing brucellous L-antigen is implemented as follows. The strain Brucella abortus 19 is cultured in the L-form on a solid nutrient medium prepared of meat-peptone liver glucose-glycerol agar (1.3-1.5% agar) with added 10-15% normal horse serum and streptomycin in a dose of 2.5-5.0 Units/ml at 37-38°C for 4-5 days. Then the prepared L-form culture is emulsified by 0.5% phenolised physiological saline; the suspension is inactivated at temperature 85-90°C for 60 minutes, centrifuged at 3000-5000 rpm for 15-20 minutes; the brucella concentration is specified at 50-60 bln microbial cells; the prepared antigen is titred, standartised by specificity and activity. The latter is used for the purpose of an agglutination test in serological diagnosis of brucellosis. The invention enables higher effectiveness and reliability of diagnosing brucellosis by 20-25%.EFFECT: invention may be used for diagnosing brucellosis in carrier animals with persistent changed L-forms of the agent.4 tbl, 3 ex Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, иммунологии, биотехнологии, а именно к технологии получения антигена для диагностики бруцеллеза. Способ получения бруцеллезного L-антигена осуществляют следующим образом. Культивируют штамм Brucella abortus 19 в L-форме на плотной питательной среде, приготовленной на основе мясо-пептонного печеночного глюкозо-глицеринового агара (1,3-1,5% агара) с добавлением 10-15% нормальной лошадиной сыворотки и стрептомицина в дозе 2,5-5,0 ЕД/мл при 37-38°C в течение 4-5 суток. Затем полученную в L-форме культуру эмульгируют 0,5% фенолизированным физиологическим раствором, инактивируют взвесь при температуре 85-90°C в течение 60 минут, центрифугируют при 3000-5000 об/мин в течение 15-20 минут и устанавливают концентрацию бруцелл 50-60 млрд м.к., полученный антиген титруют, стандартизируют по специфичности и активности. Используют для реакции агглютинации в серологической диагностике бруцеллеза. Изобретение позволяет повысить эффективность и достоверность диагностики бруцеллеза на 20-25%. Изобретение может быть использовано для диагностики бруцеллеза у животных-бруцеллоносителей с персистенцией измененных L-форм возбудителя. 4 табл., 3 пр.