METHOD OF PRODUCING RECOMBINANT HUMAN PROINSULIN C-PEPTIDE

FIELD: chemistry. ^ SUBSTANCE: invention relates to biotechnology, particularly genetic and protein engineering, as well as a method of producing recombinant human C-peptide. The disclosed method involves culturing an Escherichia coli producing strain, breaking down bacterial cells by disintegration, separating "inclusion bodies" containing a hybrid protein, dissolution thereof in a buffer containing urea and dithiothreitol, renaturating and purifying the renatured hybrid protein, disintegration thereof with trypsin and carboxypeptidase B, separation via chromatography on SP-sepharose, followed by purification and obtaining the end product. ^ EFFECT: method enables to obtain C-peptide with high output and purity of not less than 95% from wastes formed when producing recombinant human insulin. ^ 4 tbl, 6 ex Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к генной и белковой инженерии, и касается способа получения рекомбинантного с-пептида человека. Представленный способ включает культивирование штамма-продуцента Escherichia coli, разрушение бактериальных клеток дезинтеграцией, отделение «телец включения», содержащих гибридный белок, их растворение в буфере, содержащем мочевину и дитиотреитол, ренатурацию и очистку ренатурированного гибридного белка, его расщепление трипсином и карбоксипептидазой В, разделение хроматографией на SP-сефарозе с последующей очисткой и получением целевого продукта. Представленный способ позволяет получать с-пептид с высоким выходом и с чистотой не менее 95% из отходов, образующихся в процессе получения рекомбинантного инсулина человека. 4 табл., 6 пр.