METHOD OF PRODUCING RECOMBINANT SPIDER-WEB PROTEIN, FUSED PROTEIN, RECOMBINANT DNA, EXPRESSION VECTOR, HOST CELL AND PRODUCER STRAIN

FIELD: chemistry. ^ SUBSTANCE: invention relates to biotechnology and a method of producing recombinant spider-web proteins of orb-weaving spiders in yeast cells, fused proteins containing spider-web recombinant protein sequences of orb-weaving spiders, recombinant DNA encoding fused proteins, yeast host cells and expression vectors used to realise the method, as well as producer strains of recombinant proteins of orb-weaving spiders. The method involves constructing an expression vector containing a DNA sequence encoding recombinant spider-web proteins of orb-weaving proteins, fused with a sequence which encodes ubiquitin or an ubiquitin-lie protein SUMO of yeast Saccharomyces cerevisiae, which occupies the N-terminal position in the fused protein relative the recombinant spider-web protein, transformation of yeast cells with the obtained expression vector and expression of orb-weaving spider web protein in the transformed cells. ^ EFFECT: method increases production of recombinant spider-web protein during accumulation thereof in yeast cells in a water-soluble fraction in form of a protein which does not contain a hybrid component. ^ 24 cl, 6 dwg, 12 ex Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа получения рекомбинантных белков паутины паука-кругопряда в клетках дрожжей, слитых белков, содержащих последовательности рекомбинантных белков паутины паука-кругопряда, рекомбинантных ДНК, кодирующих слитые белки, клеток-хозяев дрожжей и векторов экспрессии, используемых для осуществления способа, а также штаммов - продуцентов рекомбинантных белков паутины паука-кругопряда. Способ включает конструирование вектора экспрессии, содержащего последовательность ДНК, кодирующую рекомбинантный белок паутины паука-кругопряда, слитую с последовательностью, кодирующую убиквитин или убиквитин-подобный белок SUMO дрожжей Saccharomyces cerevisiae, которая занимает в составе слитого белка N-концевое положение по отношению к рекомбинантному белку паутины, трансформацию клеток дрожжей полученным вектором экспрессии и экспрессию в трансформированных клетках белка паутины паука-кругопряда. Представленный способ позволяет увеличить продукцию рекомбинантного белка паутины при накоплении последнего в клетках дрожжей в водонерастворимой фракции в виде белка, не содержащего гибридный компонент. 7 н. и 17 з.п. ф-лы, 6 ил., 12 пр.