METHOD FOR COLLAGEN FIBRE MATURITY EVALUATION

FIELD: medicine. ^ SUBSTANCE: prepared biological material is fixed in 10% neutral formalin, imbedded in paraffin; sections are made in a microtome, thereafter placed on a slide surface and chemically purified from paraffin with using xylene with collagen fibre maturity being evaluated by two independent criteria: a degree of allowed cross striation (D-periodicity) and a collagen fibre hardness wherein the degree of allowed cross striation is evaluated as a pitch height of a slot and an overlap of separate microfibrilles by Fourier analysis (Image Analysis 3, NT-MDT) on the basis of axially transverse and longitudinal profile analysis on topographic images pre-processed by a non-linear high-frequency filter with the use of Image Analysis 3 program (NT-MDT), while the collagen fibre hardness is evaluated as a failed wave phase of a cantilever of a scanning probe microscope. The sample is tested in the air medium. ^ EFFECT: along with simplification of the method, higher result reliability is ensured. ^ 1 dwg Изобретение относится к биологии и медицине, в частности к биологии соединительных тканей, и касается способа оценки зрелости коллагеновых волокон на основе исследования тинкториальных свойств, где предварительно полученный биологический материал фиксируют в 10% растворе нейтрального формалина, заливают в парафин, срезы изготавливают на микротоме, после чего их помещают на поверхности предметного стекла с последующей химической очисткой от парафина с помощью ксилола, при этом оценка зрелости коллагеновых волокон проводится по двум независимым параметрам: степени разрешенности поперечной исчерченности (D-периодичности) и жесткости коллагеновых волокон, где степень разрешенности поперечной исчерченности оценивалась как высота шага между щелью и зоной перекрытия отдельных микрофибрилл с помощью Фурье-анализа (Image Analysis 3, NT-MDT) из анализа профилей поперек и вдоль их оси на топографических изображениях, предварительно обработанных нелинейным фильтром высоких частот с помощью программы Image Analysis 3 (NT-MDT), а жесткость биологического материала оценивается как сбой величины фазы колебания кантилевера сканирующего зондового микроскопа, при этом исследования поверхности образца проводятся на воздухе. Данное изобретение наряду с упрощением способа обеспечивает повышение достоверности результатов. 1 з.п. ф-лы, 1 ил.