METHOD FOR SYNTHESIS OF RECOMBINANT HUMAN PARATHYROID HORMONE

FIELD: medicine, pharmaceutics. ^ SUBSTANCE: invention refers to biotechnology, particularly production of recombinant proteins in Escherichia coli, and can be used for synthesis of human parathyroid hormone (rhPTH (1-34)). It involves constructing cDNA coding a fusion nucleotide ORF under control of an inducible promoter selected from a group consisting of araBAD, trp, T7, lac, Pho and trc, by cDNA amplification be means of RT-PCR with using gene-specific primers coding the rhPTH (1-34) fusion protein in which a fusion partner essentially consists of 41 amino acids produced of 124-164 amino acid of beta-galactosidase peptide (LacZ) Escherichia coli. Then the fusion protein is expressed in the presence of lactose as an inducer within 10-30% of total weight-based protein. ^ EFFECT: invention provides simplifying and reducing the price of rhPTH (1-34) synthesis ensured by optimising its expression in Escherichia coli. ^ 12 cl, 15 dwg, 2 tbl, 16 ex Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению рекомбинантных белков в Escherichia coli, и может быть использовано для синтеза паратиреоидного гормона человека (rhPTH (1-34)). Конструируют кДНК, кодирующую химерный нуклеотид ORF под контролем индуцибельного промотора, выбранного из группы, состоящей из araBAD, trp, T7, lac, Pho и trc, путем амплификации кДНК с помощью RT-PCR с использованием ген-специфических праймеров, кодирующих rhPTH (1-34) химерный гибридный белок, в котором химерный гибридный партнер по существу состоит из 41 аминокислот, полученных из 124-164 аминокислоты пептида бета-галактозидазы (LacZ) Escherichia coli. Затем экспрессируют химерный гибридный белок в присутствии лактозы в качестве индуктора в пределах около 10-30% общего белка на основе массы. Изобретение позволяет упростить и удешевить синтез rhPTH (1-34) за счет оптимизации его экспрессии в Escherichia coli. 11 з.п. ф-лы, 15 ил., 2 табл.