IMMUNOCYTOCHEMICAL ESTIMATION METHOD FOR PROLIFERATIVE LYMPHOCYTE STATE BY EXPRESSION BEHAVIOUR OF C-TERMINAL B23/NUCLEOPHOSMIN PROTEIN FRAGMENT IN INDIRECT IMMUNOFLUORESCENCE TEST

FIELD: medicine. ^ SUBSTANCE: immunocytochemical estimation method for proliferative lymphocyte state by an expression behaviour of an C-terminal B23/nucleophosmin protein fragment in indirect immunofluorescence test provides a visual cell estimation for count and size of luminous nucleoli marked by a specific anti-peptide antibody to the C-terminal B23/nucleophosmin protein fragment detecting a B23.1 protein oligomer form only of molecular weight 210-230 kDa. The intact lymphocyte value found in a cycling state G0 is the presence in a cell nucleus of no more than one luminous nucleoli detected by the specified C-fragment B23 antibody, while 2-3 luminous nucleoli are detected in lymphocytes in the process of proliferative lymphocyte activity caused by PHA stimulation in 24 hours from the initiation of the stimulation procedure, and 4-5 luminous nucleoli of greater size and more intense luminescence between + to +++ as compared with the reference are detected in the cells in 48-72 hours from the initiation of the stimulation procedure when most lymphocytes are found at the peak of proliferative activity in the cycling state S. ^ EFFECT: invention enables early diagnostics of malignant haematological and oncological diseases. ^ 3 dwg, 1 tbl, 2 ex Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способам оценки пролиферативного состояния лимфоцитов, и может быть использовано в диагностике. Способ иммуноцитохимической оценки пролиферативного состояния лимфоцитов по характеру экспрессии С-концевого фрагмента белка В23/нуклеофозмина в реакции непрямой иммунофлюоресценции предусматривает визуальную оценку в клетках количества и размеров светящихся ядрышек, маркируемых специфическим противопептидным антителом к С-концевому фрагменту белка В23/нуклеофозмина, выявляющим только олигомерную форму белка В23.1 с молекулярной массой 210-230 кДа. При этом показателем интактных лимфоцитов, находящихся в фазе G0 клеточного цикла, является наличие в ядре клетки не более одного светящегося ядрышка, выявляемого указанным антителом к С-фрагменту В23, а в процессе пролиферативной активности лимфоцитов, вызванной стимуляцией их ФГА, через 24 часа от начала стимуляции в лимфоцитах выявляется 2-3 светящихся ядрышка, а через 48-72 часа от начала стимуляции, когда большинство лимфоцитов находится на пике пролиферативной активности в S-периоде клеточного цикла, в клетках выявляется до 4-5 светящихся ядрышек, более крупного размера и большей интенсивности свечения от + до +++