METHOD FOR PRODUCING IgAl-PROTEASE FROM SEROGROUP A NEISSERIA MENINGITIDIS AND RELATED IMMUNOGENIC PREPARATION

FIELD: medicine. ^ SUBSTANCE: method consists in the serogroup A strain A 208 N. meningitidis culture growth on the modified Franz nutrient medium that is followed with the cetavlon inactivation of a culture fluid to the final concentration 0.1 % and the centrifugal sedimentation of a microbial mass, the IgAl-protease recovery and purification, and the product lyophilisation. The IgAl-protease recovery is enabled by both fractions, namely cetavlon supernatant and cetavlon sediment. The collected sediment is multiply extracted, the sediment extracts and supernatant are concentrated by an ultrafiltration technique. The prepared concentrates are fractionated by absorption chromatography on a Silochrom-80 sorbent column at temperature +8C compensated with 0.02 M phosphate salt buffer solution, pH 7.0, with IgAl-protease being produced once washing sorbent with said buffer solution. The invention makes it possible to produce a non-polysaccharide vaccine component for protection against serogroup B meningococcal infection. ^ EFFECT: invention allows to simplify the method for producing IgAl-protease of N meningitidis due to the substitution of multiphase agent inactivation by a one-phase cetavlon processing, the elimination of a gel-penetration chromatography stage, and to improve ecological safety of the process as a whole. ^ 3 cl, 6 dwg, 2 tbl Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ получения IgAl-протеазы из N. meningitidis. Способ состоит в выращивании культуры N. meningitidis серогруппы А штамм А 208 на модифицированной питательной среде Франца, с последующей инактивацией культуральной жидкости цетавлоном до конечной концентрации 0,1% и осаждением микробной массы центрифугированием, выделением IgAl-протеазы путем очистки и лиофильным высушиванием продукта. Для выделения IgAl-протеазы используют обе фракции - цетавлоновый супернатант и цетавлоновый осадок. Полученный осадок многократно экстрагируют, экстракты осадка и супернатант концентрируют методом ультрафильтрации. Полученные концентраты фракционируют методом абсорбционной хроматографии на колонке с сорбентом силохром-80 при температуре +8°С, уравновешенной 0,02 М фосфатно-солевым буферным раствором, рН 7,0, причем IgAl-протеазу получают при промывке сорбента указанным буферным раствором. Изобретение позволяет упростить способ получения IgAl-протеазы из N. meningitidis за счет замены многостадийной инактивации возбудителя на одностадийную обработку цетавлоном, исключения стадии