ISOLAMENTO DE DNA PLASMÍDICO EM SISTEMAS DE DUAS FASES AQUOSAS UTILIZANDO POLÍMEROS NEUTROS DERIVATIZADOS COM GRUPOS CATIÓNICOS

A PRESENTE INVENÇÃO CONSISTE NUM NOVO MÉTODO PARA PURIFICAÇÃO DE DNA PLASMÍDICO (PDNA) UTILIZANDO SISTEMAS DE DUAS FASES AQUOSAS. NA FORMAÇÃO DAS FASES SÃO UTILIZADOS DOIS POLÍMEROS NEUTROS COM HIDROFILICIDADES DIFERENTES E A SELETIVIDADE DE UMA DAS FASES PARA O PDNA É CONSEGUIDA PELA ADIÇÃO DE UM T...

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Bibliographische Detailangaben
Hauptverfasser:	PAULA ALEXANDRA DA SILVA JORGE, NUNO MIGUEL SAMPAIO RIBEIRO MAGALHÃES, JOÃO CARLOS RAMOS NUNES MARCOS, JOSÉ ALBERTO RIBEIRO MARTINS
Format:	Patent
Sprache:	por
Schlagworte:	BEER BIOCHEMISTRY CHEMISTRY COMPOSITIONS THEREOF CULTURE MEDIA ENZYMOLOGY METALLURGY MICROBIOLOGY MICROORGANISMS OR ENZYMES MUTATION OR GENETIC ENGINEERING PROPAGATING, PRESERVING OR MAINTAINING MICROORGANISMS SPIRITS VINEGAR WINE
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Beschreibung
Zusammenfassung:	A PRESENTE INVENÇÃO CONSISTE NUM NOVO MÉTODO PARA PURIFICAÇÃO DE DNA PLASMÍDICO (PDNA) UTILIZANDO SISTEMAS DE DUAS FASES AQUOSAS. NA FORMAÇÃO DAS FASES SÃO UTILIZADOS DOIS POLÍMEROS NEUTROS COM HIDROFILICIDADES DIFERENTES E A SELETIVIDADE DE UMA DAS FASES PARA O PDNA É CONSEGUIDA PELA ADIÇÃO DE UM TERCEIRO POLIMERO NEUTRO DERIVATIZADO COM GRUPOS CATIÓNICOS. EXEMPLOS DESTES POLÍMEROS SÃO POLIETILENEGLICOL (PEG) DERIVATIZADO COM O GRUPO AMINA (PEG-AMINA) OU OS AMINOÁCIDOS LISINA (PEG-LIS), ARGININA (PEG-ARG) E HISTIDINA (PEG-HIS). O PROCESSO DE PURIFICAÇÃO É REALIZADO EM APENAS 4 PASSOS FUNDAMENTAIS: PREPARAÇÃO DA AMOSTRA BIOLÓGICA PARA EXTRAÇÃO DO PDNA, CAPTURA DO PDNA, REMOÇÃO DE CONTAMINANTES E REMOÇÃO DOS COMPONENTES DA FASE. The present invention is a new method for the purification of plasmid DNA (pDNA) using systems with two aqueous phases. Two neutral polymers with different hydrophilicity are used for the formation of the two phases. The selectivity of one of the phases for the pDNA is achieved by adding a third neutral polymer derivatized with a cationic group. Examples of these polymers are polyetileneglycol (PEG) derivatized with amine (PEG-amine) or the amino acids lysine (Lys-PEG), arginine (Arg-PEG) and histidine (His-PEG). The purification process is performed in only four fundamental steps: preparation of the biological sample for extraction of pDNA, pDNA capture, contaminants removal and removal of the phase components. It also features a kit that allows easy application of the method.